4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ И САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВОДЫ ПОВЕРХНОСТНЫХ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. Методика. Министерство здравоохранения РФ. 03.03.04 МУК 4.2.1884-04

5.3. Выполнение анализа

     Объем испытуемой воды для посева выбирают с таким расчетом, чтобы
не   менее  чем  на  2-х  фильтрах  выросли  изолированные  колонии  в
количестве  от  5  до 50 при диаметре фильтра 35 мм и от 10 до 100 при
диаметре фильтра 47 мм.
     При   этом   можно   ориентироваться   на  результаты  предыдущих
исследований  воды  в  этом же месте водоема и на рекомендации таблицы
Приложения 9.
     При исследовании воды неизвестного качества количество засеваемых
десятикратных объемов увеличивают до 3 - 4.
     Отмеренный объем воды фильтруют через мембранные фильтры, как это
описано в п. 2.6.
     Фильтры  с  посевами  помещают  на  азидную  среду  (п. 2.4.14) и
инкубируют при температуре (37 +/- 1) град.С в течение 48 ч.
     Для  учета  выбирают  фильтры,  на которых выросло число колоний,
указанное выше.
     Подсчитывают  колонии,  характерные для энтерококков: выпуклые, с
ровными  краями,  темно-малиновые, розовые, светло-розовые, равномерно
окрашенные или с темно-красным нечетко оформленным центром.
     Очень мелкие (на пределе видимости невооруженным глазом), плоские
разных   оттенков,   ярко-малиновые   с  четко  выраженным  центром  и
бесцветным  ободком  колонии не учитывают. Дифференциацию энтерококков
от  посторонней  микрофлоры  можно проводить по морфологии колоний под
бинокулярной лупой.
     При  необходимости  подтвердить  наличие  энтерококков  по  2 - 3
колонии каждого типа:
     - микроскопируют  после  окраски по Граму (МУК 4.2.1018-01) и при
обнаружении  в мазках грамположительных, как правило, слегка вытянутых
с заостренными концами диплококков, дают положительный ответ;
     - пересевают секторами на солевой агар с ТТХ (п.  2.4.15) и после
24  -  48 ч инкубации посевов при температуре 37 град.С энтерококки на
среде дают равномерный нежный рост на протяжении  всего  штриха.  Иные
бактерии на этой подтверждающей среде не растут;
     - выполняют каталазный тест, нанося петлей культуру на предметное
стекло.    После    подсушивания    на    воздухе    добавляют   каплю
свежеприготовленной  3%-ной  перекиси  водорода,  прикрывают покровным
стеклом.  При  отсутствии пузырьков газа - каталазоотрицательный тест.
Контрольная каталазоположительная культура - любой вид стафилококков.