Фрагмент документа "ЭКСПЕРТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ АМФЕТАМИНА. МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ <1>".
3. Исследование методом газовой хроматографии и
хроматомасс-спектрометрии
Исследование методом газовой хроматографии применяют для
качественного выявления амфетаминов и их количественного определения.
Газохроматографический анализ проводят при следующих условиях:
колонка кварцевая капиллярная длиной 12 - 20 м и диаметром 0,2 - 0,3
мм с метилсиликоновой стационарной фазой (OV-101, SE-30, SE-54, OV-1).
Температура испарителя - 220 град.C, детектора - 290 град.C.
Температура колонки меняется от 100 град.C до 280 град.C со скоростью
10 град.C/мин. Газ-носитель - гелий (азот), детектор
пламенно-ионизационный. Ввод пробы с делением потока.
В ходе исследования таблетку растирают в ступке и гомогенизируют
полученный порошок встряхиванием. Навеску измельченной таблетки массой
около 3 - 4 мг заливают 1 мл хлороформа, добавляют каплю 0,1 N водного
раствора КОН (NaOH), доводят смесь до кипения, охлаждают и дают
отстояться.
Если соответствующий амфетамин нанесен на бумажки, к 1 - 2
взвешенным и измельченным ножницами бумажкам размером 1 см х 1 см
добавляют 1 мл хлороформа, 1 каплю 0,1 N водного раствора КОН (NaOH),
доводят растворитель до кипения; после охлаждения отбирают
растворитель, добавляют новую порцию хлороформа, доводят его до
кипения, растворитель также отбирают и объединенные хлороформные
экстракты упаривают досуха. К упаренному экстракту добавляют 1 мл
хлороформа, доводят до кипения и охлаждают.
1 мкл полученных экстрактов из таблетки и бумажек
хроматографируют в указанных условиях.
Однако часто амфетамины хроматографируются в виде несимметричных
пиков, поэтому необходимо проводить исследование, получая их
ацетильные производные. Для этого к 3 - 4 мг растертой в порошок
таблетки или упаренному досуха экстракту с бумажек добавляют 0,2 мл
уксусного ангидрида (ангидрида трифторуксусной кислоты) и выдерживают
смесь в течение 30 - 40 мин. в закрытой склянке при 70 град.C (при
использовании ангидрида трифторуксусной кислоты смесь выдерживают 10
мин. при комнатной температуре. Указание: при работе с ангидридом
трифторуксусной кислоты необходимо работать под тягой). Пробу
полученного раствора после охлаждения хроматографируют в указанных
выше условиях. Температура испарителя в этом случае равна 260 град.C.
Индексы удерживания амфетаминов и их ацетильных производных приведены
в табл. 6.
Таблица 6
ЗНАЧЕНИЯ ИНДЕКСОВ УДЕРЖИВАНИЯ АМФЕТАМИНОВ
И ИХ АЦЕТИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ
------------------------------------------------------------------
| Амфетамин | Индекс | Индекс удерживания | Относительный |
| |удерживания | ацетильного | массовый |
| | вещества | производного | коэффициент к |
| | | вещества | метилстеарату |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|1. МДА |1465 |1816 |1,35 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|2. МДМА |1515 |1905 |1,25 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|3. МДЕА |1566 |1951 |1,48 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|4. ДОМ |1608 |1918 |1,19 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|5. ПМА |1383 |1718 |1,17 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|6. ДМА |1595 |1856 |1,20 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|7. ТМА |1688 |2010 |1,45 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|8. ДОБ |1790 |2111 |1,53 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|9. ДОХ |1714 |2025 |1,53 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|10. МБДБ |1610 |1969 |1,24 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|11. БДБ |1567 |1902 |1,58 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|12. ДОЭТ |1660 |1959 |1,10 |
|------------|------------|--------------------|-----------------|
|13. Мескалин|1677 |2018 |0,95 |
------------------------------------------------------------------
Количественное определение проводят следующим образом: таблетку
растирают в ступке и гомогенизируют полученный порошок встряхиванием.
Если соответствующий амфетамин нанесен на бумажки, к 1 - 2
взвешенным и измельченным ножницами бумажкам размером 1 см х 1 см
добавляют 1 мл хлороформа, каплю 0,1 N водного раствора КОН (NaOH),
доводят растворитель до кипения; после охлаждения отбирают как можно
больше растворителя, стараясь не захватить водную часть, добавляют
новую порцию хлороформа, доводят его до кипения; растворитель также
отбирают и объединенные хлороформные экстракты упаривают досуха.
К навеске растертой в порошок таблетки массой 3 - 4 мг (берут
точную навеску) добавляют 1 мг метилстеарата (металстеарат либо
взвешивают на весах, либо при отсутствии весов соответствующей
точности 1 мл раствора метилстеарата в хлороформе, гексане или пентане
помещают в склянку и осторожно упаривают растворитель досуха, после
чего в этой же склянке взвешивают навеску растертой таблетки), 0,4 мл
уксусного ангидрида и нагревают на плитке при температуре 70 град.C в
течение 30 мин. в плотно закрытой склянке (нагрев осуществляют до
исчезновения в смеси нативного амфетамина - контроль проводят методом
тонкослойной или газовой хроматографии). После окончания нагрева,
охлаждения и отстаивания 1 мкл полученной смеси хроматографируют на
кварцевой капиллярной колонке длиной 12 - 20 м и диаметром 0,2 мм с
метилсиликоновой стационарной фазой (OV-101, SE-30, SE-54, OV-1).
Температура испарителя - 260 град.C, детектора - 290 град.C.
Температура колонки меняется от 150 град.C до 280 град.C со скоростью
10 град.C/мин. Газ-носитель - гелий (азот), детектор
пламенно-ионизационный. На коротких колонках (до 20 м) ацетильное
производное ДОБ может не разделиться с метилстеаратом. В этом случае
скорость нагрева колонки необходимо уменьшить до 5 град.C/мин.
Перед определением проводят калибровку хроматографа с
использованием чистых метилстеарата и соответствующего амфетамина. При
отсутствии образцов чистых амфетаминов используют относительные
массовые коэффициенты (табл. 6).
В этом случае расчет содержания производного амфетамина проводят
по формуле:
X = (S x m / S x m ) x K x 100,
x ст ст п
где:
S - площадь пика производного амфетамина;
x
S - площадь пика внутреннего стандарта;
ст
m - количество стандартного образа, мг;
ст
m - количество исходной пробы, мг;
п
K - относительный массовый коэффициент.
При количественном определении можно также использовать ангидрид
трифторуксусной кислоты. Подготовку пробы в этом случае проводят так
же, как и в случае уксусного ангидрида, однако после добавления
ангидрида уксусной кислоты смесь не нагревают, а выдерживают при
комнатной температуре 10 мин., после этого ангидрид уксусной кислоты
осторожно отгоняют на плитке досуха, добавляют 1 мл хлороформа и
хроматографируют 1 мкл полученной смеси в тех же условиях, что и при
использовании ангидрида уксусной кислоты.
Исследование методом хроматомасс-спектрометрии проводят для
качественного выявления амфетаминов. Для исследования были подобраны
следующие условия. Предварительное разделение компонентов пробы на
кварцевой капиллярной колонке длиной 12 - 25 м и диаметром 0,2 мм с
диметилсиликоновой стационарной фазой. Температура испарителя - 220
град.C, интерфейса детектора - 280 град.C. Температура колонки
меняется от 100 град.C до 280 град.C со скоростью 10 град.C/мин.
Газ-носитель - гелий. Ионизация электронным ударом (энергия 70 ЭВт).
Подготовка пробы аналогична пробоподготовке для газовой хроматографии
без дериватизации.
Следует отметить, что работа с уксусным ангидридом сопряжена с
определенными сложностями, поэтому исследование амфетаминов нужно
проводить с чистой газохроматографической системой (т.е. необходимо
проводить регулярную чистку детектора, инжектора и кондиционирование
хроматографической колонки). После окончания работы с уксусным
ангидридом нужно ввести в инжектор хроматографа 3 раза по 1 мкл
метанола или этанола.
|
Фрагмент документа "ЭКСПЕРТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ АМФЕТАМИНА. МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ <1>".