ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА "АТИПИЧНОЙ ПНЕВМОНИИ" (SARS) МЕТОДОМ ПЦР. ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ. Рекомендации. Главный государственный санитарный врач РФ. 03.05.03

1. Введение

     1.1.  Настоящие  Методические  рекомендации  определяют временный
порядок    и   правила   проведения   лабораторных   исследований   по
специфической  детекции  РНК коронавирусов, вызывающих синдром острого
респираторного  заболевания,  или атипичную пневмонию, или SARS (далее
по  тексту  -  SARS)  до  завершения разработки и внедрения в практику
диагностических препаратов к вирусу SARS.
     1.2.  Рекомендации  разработаны  для  специалистов  противочумных
институтов,  противочумных станций и других учреждений, осуществляющих
лабораторную диагностику SARS, в соответствии с "Временной инструкцией
по    лабораторной   диагностике   синдрома   острого   респираторного
заболевания  (атипичной пневмонии) (SARS)" (письмо Первого заместителя
Министра здравоохранения Российской Федерации от 21.04.03).
     1.3. Инкубационный период SARS составляет 2 - 14 суток, в среднем
7  -  10  суток,  лихорадочный  период  - до 10 - 14 суток. РНК вируса
методом ПЦР выявляют в биологических жидкостях: крови, мокроте, смывах
носоглотки на 1 - 10 сутки заболевания.
     1.4.  В  связи  с  существенными  трудностями в культивировании и
выделении  коронавирусов,  методы генодиагностики являются в настоящее
время   ведущими   в   подтверждении   связи   заболевания  "атипичной
пневмонией"  с  вирусом  SARS.  Принцип  метода состоит в направленной
амплификации  кДНК, синтезируемой с помощью обратной транскриптазы, на
основе   специфичного   фрагмента   РНК   вируса.  С  целью  повышения
достоверности  анализа  рекомендуется  проведение  ПЦР  с двумя парами
праймеров (используются раздельно).
     1.5.  В  Методических  рекомендациях  представлены протоколы ПЦР,
основанные   на   рекомендациях   ВОЗ,  до  появления  первых  случаев
заболеваний  "атипичной  пневмонии"  в  России.  Протоколы  могут быть
модифицированы в дальнейшем, по мере изменения ситуации.
     1.6.  В  соответствии  с  "Временной  инструкцией..."  вирус SARS
отнесен    ко    II   группе   патогенности.   С   учетом   отсутствия
регламентированных  методов  инактивации  вирусов  при  исследованиях,
проводимых  методом  ПЦР,  и  доказанной  высокой  опасности заражения
медицинского  персонала вся работа проводится с тщательным соблюдением
мер  биобезопасности  регламентированных  СП  1.2.011-94 "Безопасность
работы  с  микроорганизмами I - II групп патогенности" и СП 1.2.036-95
"Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов
I - IV групп патогенности".