Фрагмент документа "О НАДЗОРЕ ЗА ОБОРОТОМ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ, СОДЕРЖАЩИХ ГМО".
III. Молекулярно-генетический анализ
пищевой продукции, полученной с использованием
генно-инженерно-модифицированных микроорганизмов
и микроорганизмов, имеющих генно-инженерно -
модифицированные аналоги, методом ПЦР с детекцией
результатов методом электрофореза
3.1. Необходимость проведения лабораторных исследований для
конкретных видов пищевой продукции, полученной с использованием ГММ и
МГМА, определяется экспертом с учетом анализа представленной
заявителем документации, перечня микроорганизмов, используемых в
пищевой промышленности и имеющих генно-инженерно-модифицированные
аналоги. Экспертные исследования включают подтверждение данных,
предоставленных заявителем, а при необходимости - проверку на наличие
возможных недекларированных генетических модификаций.
3.2. Для обнаружения ГММ проводят исследования на наличие
трансгенов (чужеродных генов), регуляторных или маркерных векторных
последовательностей. Наличие таких последовательностей свидетельствует
о произведенных генетических модификациях. Обнаружение
последовательностей таких генов производят с помощью специфичного и
высокочувствительного метода полимеразной цепной реакции (ПЦР).
3.3. Рекомендуемые стратегии международных организаций (ФАО/ВОЗ)
для выявления генетических модификаций предусматривают определение
наиболее часто употребляемых последовательностей векторов - плазмид, с
помощью которых генетическая информация вводится в клетку. В качестве
маркеров используют гены, по которым проводят селекцию
модифицированных клеток (гены антибиотикорезистентности,
бактериоцинов), последовательности регуляторных векторных генов
(полилинкеры, промоторы или терминаторы), а также последовательности
мигрирующих элементов. Обнаружение таких последовательностей
свидетельствует о возможных недокументированных генетических
модификациях и требует проведения дополнительных исследований штаммов
и/или продуктов.
3.4. Проведение дополнительных исследований осуществляют с
использованием методов гибридизационного и рестрикционного анализа,
секвенирования, анализа функционирования целевой вставки (изучение РНК
и белка, продуцируемых чужеродной ДНК) в соответствии с официально
утвержденными методами анализа.
3.5. Для качественного определения ДНК генно-инженерно -
модифицированных микроорганизмов в пищевых продуктах и биологически
активных добавках к пище (БАД) методом ПЦР используют тест-системы,
включающие многокомпонентные наборы реагентов и праймеров
(искусственно синтезированных олигонуклеотидов, комплементарных
соответствующим участкам ДНК-мишени), предназначенные для выявления
селективных маркерных генов, наиболее часто употребляемых при
конструировании ГММ. Обнаружение маркерных генов у штаммов
микроорганизмов, используемых при производстве пищевых продуктов,
свидетельствует о произведенных генетических модификациях.
В тест-системы входят праймеры, фланкирующие следующие
последовательности:
1) гена ermC, кодирующего устойчивость к эритромицину, плазмиды
pE194 Staphylococcus aureus (размер фрагмента 349 п.н.);
2) гена tetO, кодирующего устойчивость к тетрациклину хромосомы
Streptococcus pneumoniae (размер фрагмента 242 п.н.);
3) гена amp, кодирующего устойчивость к ампициллину, плазмиды
pBR322 Esherichia coli (размер фрагмента 321 п.н.);
4) гена lacZ, кодирующего фермент бета-галактозидазу, хромосомы
Esherichia coli (размер фрагмента 158 п.н.);
5) гена ori, кодирующего ориджин репликации, плазмиды p15A
Esherichia coli (размер фрагмента 382 н.п.);
6) гена hph, кодирующего устойчивость к гигромицину, хромосомы
Streptomyces hygroscopicus (размер фрагмента 288 н.п);
7) гена Sh ble, кодирующего устойчивость к блеомицину, хромосомы
Streptomyces verticillus (размер фрагмента 301 н.п.).
3.6. Выбранный в соответствии с правилами молекулярного дизайна и
международных баз данных (с применением программ "Oligo 4.0", "Blast"
и их аналогов) набор праймеров обеспечивает проведение многофакторного
анализа выбранных последовательностей.
3.7. Для каждой конкретной пары праймеров ПЦР проводят с
использованием оптимального соотношения компонентов реакционной смеси,
структуры программы амплификации (временных и температурных
характеристик каждого этапа амплификации) и адекватного метода
детекции результатов, для исключения перекрестных реакций с
неспецифическими ДНК и обеспечения необходимого уровня
чувствительности и специфичности реакции.
3.8. Специфичность и чувствительность наборов праймеров и
реагентов (положительные результаты ПЦР в пробах с контролями ДНК
4
селективных маркеров при концентрации не менее 5 x 10 ГЭ/мл,
отсутствие перекрестных реакций с неспецифическими ДНК при
3
концентрации не менее 1 x 10 ГЭ/мл) подтверждают на препаратах ДНК,
выделенных из штаммов микроорганизмов, указанных в таблице 1.
Таблица 1
---------------------------------------------------------------------------
|N N| Микроорганизм | Номер штамма |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 1 | Escherichia coli | M-17 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 2 | Lactobacillus acidophilus | Шт. Биобактон |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 3 | Lactobacillus acidophilus | Шт. 1К В-2991 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 4 | Bifidobacterium animalis | Bb-12 |
| |(lactis) | |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 5 | Bifidobacterium bifidum | Шт. N 1 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 6 | Lactobacillus acidophilus | E.P. 317/402 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 7 | Lactobacillus casei | Шт. 163 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| | | R |
| 8 | Laclobacillus acidophilus | K/A - 08 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
| 9 | Saccharomyces cerevisiae | Шт. АлкоИст |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
|10 | Композиция бифидобактерий | B. bifidum, N ВКПМ Ac 1248(8-3); |
| | Bifidobacterium bifidum |B. longum, N Ac 1531 (ДВА-13), B. |
| | Bifidobacterium bifidum |bifidum 791 БАГ |
| | Bifidobacterium longum | |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
|12 | Lactobacillus paracasei, | Шт. Dalton |
| | subsp. paracasei | |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
|14 | Композиция Lactobacillus | Шт. 8P-A3 La + шт. 90TC-4 |
| | planlarum + Lactobacillus | |
| | fermentum | |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
|15 | Lactobacillus casei | Шт.-01 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
|16 | Lactococcus cremoris | Шт. 322 |
|---|--------------------------------|------------------------------------|
|17 | Streptococcus thermophilus | Шт. KTc 3 E.A. |
---------------------------------------------------------------------------
3.9. Для выявления ДНК генно-инженерно-модифицированных
микроорганизмов в пробах с различными уровнями содержания микробной
ДНК и ДНК пищевого субстрата используют два вида тест-систем:
- комплект N 1А для выделения ДНК из ферментных препаратов,
стартерных и заквасочных культур, БАД;
- комплект N 1Б для выделения ДНК из пищевых продуктов.
3.10. Выделение ДНК из бактериальных культур с помощью комплекта
N 1А включает лизис бактериальных клеток с последующим осаждением ДНК
на двуокиси кремния. Выделение ДНК из образцов пищевых продуктов с
помощью комплекта N 1Б включает предварительную обработку пробы
гомогенизированных образцов протеиназой К, лизис, дополнительную
обработку депротеинизирующим раствором и осаждение ДНК на двуокиси
кремния.
3.11. Для выявления ГММ и МГМА в пищевых продуктах используют
следующие материалы, оборудование, реактивы:
1) программируемый термостат (ДНК-амплификатор) типа "Терцик МС2"
или иные типы амплификаторов, зарегистрированные в Российской
Федерации в установленном порядке;
2) термостат, поддерживающий температуру +45 град.C, для пробирок
объемом 1,5 мл;
3) центрифуга со скоростью вращения ротора до 12 000 об./мин. для
пробирок вместимостью 1,5 и 0,5 мл типа "эппендорф";
4) встряхиватель вибрационный типа "вортекс" со скоростью
вращения до 3 000 об./мин.;
5) прибор для горизонтального электрофореза;
6) источник постоянного тока;
7) водяная баня с подогревом до +95 град.C или СВЧ-печь;
8) ультрафиолетовый трансиллюминатор;
9) очки/маска защитные;
10) холодильник бытовой электрический;
11) морозильная камера, обеспечивающая температуру (-20) град.C
или ниже;
12) гомогенизатор типа "SilentCrusher" или других моделей;
13) ступка фарфоровая с пестиком;
14) пинцет медицинский;
15) ножницы медицинские;
16) скальпель медицинский;
17) весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности;
18) дистиллятор;
19) анализатор потенциометрический;
20) облучатель бактерицидный настенный;
21) дозаторы с переменным объемом дозирования: 0,2 - 2,0 мм3 с
шагом 0,01 мм3, 0,5 - 10,0 мм3 с шагом 0,01 мм3, 2 - 20 мм3 с шагом
0,01 мм3, 20 - 200 мм3 с шагом 0,1 мм3, 100 - 1000 мм3 с шагом 1 мм3,
2 - 10 см3 с шагом 0,1 см3;
22) пробирки типа "эппендорф" вместимостью 1,5 мл;
23) пробирки типа "эппендорф" для ПЦР вместимостью 0,5 мл;
24) наконечники полимерные объемом 1 - 200 мкл;
25) наконечники полимерные объемом 200 - 1000 мкл;
26) перчатки резиновые;
27) колбы плоскодонные конические разной вместимости;
28) цилиндры стеклянные мерные лабораторные вместимостью 25, 100,
1000 см3;
29) воронки стеклянные;
30) штативы для пробирок объемом 1,5 и 0,5 мл;
31) комплект N 1А для выделения ДНК из ферментных препаратов,
стартерных и заквасочных культур, БАД к пище;
32) комплект N 1Б для выделения ДНК из пищевых продуктов;
33) комплект N 2 "Набор реагентов для выявления селективных
маркеров генетически модифицированных микроорганизмов";
34) комплект N 3 "Набор реагентов для выявления селективных
маркеров генетически модифицированных микроорганизмов";
35) реактивы:
- тритон X-100,
- гуанидина гидрохлорид,
- ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота),
- додецилсульфат натрия,
- суспензия двуокиси кремния,
- фенол водонасыщенный,
- хлороформ водонасыщенный,
- спирт этиловый ректификованный,
- ацетат аммония,
- протеиназа К,
- магния хлорид,
- калия хлорид,
- водный раствор дезоксинуклетидтрифосфатов (0,1 М),
- креозоловый красный,
- термостабильная ДНК-полимераза,
- масло вазелиновое,
- трис-ацетат,
- ледяная уксусная кислота,
- агароза для электрофореза,
- бромистый этидий,
- вода деионизированная.
3.12. Допускаются к использованию тест-системы, комплекты
(наборы) реагентов и материалы аналогичного назначения других типов,
разрешенные к применению в установленном порядке и с характеристиками,
обеспечивающими проведение исследований в соответствии с настоящими
Методическими указаниями.
3.13. Отобранные согласно установленному порядку и нормам отбора
проб (в соответствии с официально утвержденными нормативными и
техническими документами) образцы подготавливают к процедуре выделения
ДНК ГММ и МГМА двумя способами, в зависимости от их принадлежности к
группам пищевой продукции:
- из образцов проб ферментных препаратов, заквасочных и
стартерных культур, БАД готовят растворы 30%-й концентрации в
стерильной деионизированной воде. Для этого вносят 300 мг (мкл)
порошка или суспензии исходного образца в 700 мкл стерильной
деионизированной воды и перемешивают на вихревом смесителе в течение 3
- 5 с. При необходимости образец предварительно измельчают до
гомогенного состояния в ступке или с помощью гомогенизатора;
- из образцов других пищевых продуктов готовят растворы 50%-й
концентрации, для чего к 500 мг (мкл) пробы добавляют 500 мкл
стерильной деионизированной воды и перемешивают на вихревом смесителе
в течение 3 - 5 с. Твердый образец предварительно измельчают до
гомогенного состояния в ступке или с помощью гомогенизатора.
Подготовленные образцы используют для анализа в тот же день.
Допускается хранение образцов при температуре минус 20 град.C не более
2-х недель.
3.14. Выделение ДНК ГММ и МГМА из образцов исследуемой пищевой
продукции проводят с использованием комплектов (наборов) реагентов для
выявления селективных маркеров генно-инженерно-модифицированных
микроорганизмов. Допускается применение фенол-хлороформного или
другого адекватного метода экстракции ДНК.
3.15. Выделение ДНК из заквасочных и стартерных культур, БАД к
пище, ферментных препаратов проводят с использованием комплекта N 1А
"Набор реагентов для выявления селективных маркеров генетически
модифицированных микроорганизмов".
Комплект N 1А для выделения ДНК включает:
- лизирующий раствор, содержащий гуанидинтиоцианат (раствор 1) -
1 фл. (30 мл);
- раствор для отмывки, содержащий гуанидинтиоцианат (раствор 2) -
1 фл. (15 мл);
- раствор для отмывки (раствор 3) - 2 фл. (по 70 мл);
- суспензия двуокиси кремния - 1 пробирки (0,5 мл).
3.15. Выделение ДНК комплектом N 1А включает следующие этапы:
- исследуемый материал в объеме 700 мкл центрифугируют в течение
10 минут при комнатной температуре (+18 - 25 град.C) при 12000
об./мин.;
- удаляют 600 мкл надосадочной жидкости; оставшийся материал (100
- 110 мкл) тщательно перемешивают в пробирке на вортексе и добавляют к
суспензии 300 мкл раствора 1 и 5 мкл суспензии двуокиси кремния;
- пробы инкубируют в течение 15 минут при комнатной температуре,
периодически перемешивая на вортексе;
- пробы центрифугируют в течение 30 сек., при комнатной
температуре при 12000 об./мин., супернатант удаляют;
- к осадку добавляют 150 мкл раствора 2, встряхивают его на
вортексе и центрифугируют в течение 30 сек. при комнатной температуре
при 12000 об./мин., супернатант удаляют;
- к осадку добавляют 700 мкл раствора 3, встряхивают его на
вортексе и центрифугируют в течение 30 сек. при комнатной температуре
при 12000 об./мин., супернатант удаляют; проводят повторную процедуру
отмывки;
- дополнительным центрифугированием с последующим удалением
супернатанта убирают остатки раствора 3, пробы подсушивают в течение 5
мин. при температуре +45 град.C, оставляя пробирки открытыми;
- добавляют в каждую пробирку 50 мкл деионизированной воды,
перемешивают на вортексе и инкубируют в течение 5 мин. при температуре
+45 град.C;
- пробы центрифугируют при комнатной температуре в течение 30
сек. при 12000 об./мин., водную фазу отбирают в другую пробирку и
используют в качестве исследуемого образца ДНК для постановки реакции
амплификации либо хранят при температуре -20 град.C не более двух
недель.
3.16. Выделение ДНК ГММ и МГМА из пищевых продуктов проводят с
использованием комплекта N 1Б "Набор реагентов для выявления
селективных маркеров генетически модифицированных микроорганизмов".
При повышенном содержании жиров проводится дополнительная экстракция
суспензией неполярных растворителей с водой для перевода содержащейся
в пищевом продукте ДНК в водную фазу, в которой и производится
дальнейшая очистка.
Комплект N 1Б для выделения ДНК из пищевых продуктов включает:
- раствор 1 (лизирующий буфер, pH 8,0) - 1 фл. (15 мл);
- раствор 2 (смесь фенола с хлороформом, 1:1) - 1 фл. (20 мл);
- раствор 3 (хлороформ) - 1 фл. (20 мл);
- раствор 4 (ацетат аммония 5 М) - 1 фл. (5,0 мл);
- раствор 5 (спирт этиловый 96%) - 4 фл. (по 20 мл);
- раствор 6 (спирт этиловый 75%) - 1 фл. (12 мл);
- раствор 7 (ТЕ-буфер, pH 8,0) - 1 фл. (6,0 мл);
- протеиназу К - 1 пробирки (3,0 мг).
3.17. Выделение ДНК комплектом N 1Б включает следующие этапы:
- раствор 1 прогревают при температуре +25 град.C до полного
растворения осадка, непосредственно перед применением к раствору 1
добавляют протеиназу К до концентрации 200 мкг/мл (0,001 г на 5,0 мл);
- в полипропиленовую пробирку вместимостью 1,5 мл вносят 100 мкл
гомогенизированного образца, добавляют 100 мкл раствора 1,
перемешивают на вихревом смесителе в течение 3 - 5 сек.;
- пробирки инкубируют при температуре +55 град.C в течение 40
мин.;
- добавляют 200 мкл (равный объем) раствора 2, перемешивают на
вихревом смесителе в течение 10 сек. и центрифугируют при комнатной
температуре (+18 - 25 град.C) в течение 5 мин. при 10000 - 12000
об./мин. (10000 - 13000 g);
- отбирают верхнюю (водную) фазу и вносят ее в полипропиленовую
пробирку вместимостью 1,5 мл, в эту пробирку добавляют 200 мкл (равный
объем) раствора 3;
- перемешивают на вихревом смесителе в течение 3 - 5 сек. и
центрифугируют при комнатной температуре 2 мин. при 10000 - 12000
об./мин. (10000 - 13000 g).
Отбирают водную фазу (200 мкл) и вносят ее в полипропиленовую
пробирку вместимостью 1,5 мл, в эту пробирку добавляют 40 мкл раствора
4 и 720 мкл (3 объема) раствора; перемешивают на вихревом смесителе в
течение 3 - 5 сек.;
- инкубируют при комнатной температуре в течение 40 мин.;
- центрифугируют при комнатной температуре (+18 - +25 град.C) в
течение 15 мин. при 12000 об./мин. (13000 g); супернатант удаляют;
- в пробирку вносят 100 мкл раствора 6;
- центрифугируют в течение 1 мин. при комнатной температуре при
12000 об./мин. (13000 g); супернатант удаляют; осадок сушат на воздухе
в течение 10 мин.;
- растворяют осадок в 50 мкл раствора 7; полученные образцы ДНК
используют для дальнейшего анализа.
3.18. Проведение ПЦР осуществляют с использованием комплекта N 2
реагентов для амплификации ДНК "Набор реагентов для выявления
селективных маркеров генетически модифицированных микроорганизмов".
Комплект N 2 реагентов для амплификации ДНК включает:
- ПЦР-смесь 1 (реакционный буфер, смесь олигонуклеотидных
праймеров и дезоксинуклеозидтрифосфатов) - 8 пробирок по 1300 мкл;
- ПЦР-смесь 2 (термостабильная ДНК-полимераза) - 4 пробирки (200
мкл);
- масло минеральное - 8 пробирок по 1300 мкл;
- положительные контрольные образцы ДНК (плазмидная ДНК с
клонированным специфическим фрагментом соответствующих маркерных
генов) - 4 пробирки по 30 мкл;
- отрицательные контрольные образцы (плазмидная ДНК pET-9) - 4
пробирки по 30 мкл.
3.19. Проведение ПЦР с использованием комплекта N 2 включает
следующие этапы:
- перед началом работы вынимают из морозильной камеры комплект
реагентов для амплификации (кроме ПЦР-смеси 2), размораживают
содержимое пробирок при комнатной температуре, тщательно перемешивают
на вихревом смесителе в течение 10 сек. и помещают все пробирки в
холодильник;
- амплификационные пробирки вместимостью 0,2 (или 0,5) мл
маркируют в соответствии с маркировкой анализируемых образцов,
пробирки для положительного контрольного образца ДНК маркируют как ПК,
для отрицательного контрольного образца - ОК;
- рабочий раствор для проведения реакции амплификации готовят в
количестве, достаточном для анализа всех проб (при анализе N образцов
рабочий раствор готовится в количестве, необходимом для анализа N+1
образцов); для этого в пробирку вместимостью 1,5 мл вносят из расчета
на одну пробу по 25 мкл ПЦР-смеси 1 и по 2,0 мкл ПЦР-смеси 2;
тщательно перемешивают;
- в каждую пробирку с анализируемыми образцами и в пробирки ПК и
ОК вносят по 27 мкл рабочего раствора;
- в каждую пробирку добавляют по 1 капле (или 20 мкл)
минерального масла;
- в каждую пробирку с анализируемыми образцами вносят под масло
по 3,0 мкл исследуемой ДНК (используют наконечники с аэрозольным
барьером) и закрывают их.
В пробирку, маркированную ОК, внести под масло 3,0 мкл
отрицательного контрольного образца и закрыть ее:
- в пробирку, маркированную ПК, вносят под масло 3,0 мкл
положительного контрольного образца ДНК и закрывают ее;
- содержимое пробирок осторожно перемешивают пипетированием и
центрифугируют при комнатной температуре в течение 5 сек. при 10000
об./мин. (11000 g);
- все пробирки устанавливают в блок амплификатора и проводят
амплификацию с учетом объема реакционной смеси, равного 30 мкл;
программа амплификации представлена в таблице 2:
-------------------------------------------------
| N | Температура | Время |Количество |
| п/п | | | повторов |
|-----|------------------|----------|-----------|
| 1 | +37 град.С | 10 мин. | 1 раз |
|-----|------------------|----------|-----------|
| 2 | +95 град.С | 10 мин. | 1 раз |
|-----|------------------|----------|-----------|
| 3 | +94 град.С | 30 сек. | 30 раз |
| |------------------|----------| |
| | +60 град.С | 30 сек. | |
| |------------------|----------| |
| | +72 град.С | 30 сек. | |
|-----|------------------|----------|-----------|
| 4 | +72 град.С | 5 мин. | 1 раз |
|-----|------------------|----------|-----------|
| 5 | +10 град.С | Хранение | |
-------------------------------------------------
3.20. Результаты ПЦР регистрируют методом электрофореза в 1,2%
агарозном геле, приготовленном на 1-кратном трис-ацетатном (ТАЕ)
буфере с использованием комплекта N 3 "Набор реагентов для выявления
селективных маркеров генетически модифицированных микроорганизмов".
3.21. Детекция результатов ПЦР методом электрофореза включает
следующие этапы:
- приготовление ТАЕ буфера: 20 мл 50-кратного концентрированного
ТАЕ буфера вносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят до
метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают;
- приготовление 1,2% агарозного геля: 0,6 г агарозы растворяют в
50 мл 1 x ТАЕ буфера нагреванием в кипящей водяной бане до полного и
равномерного растворения, полученный раствор охлаждают до температуры
+60 град.C, добавляют 6 мкл 1% раствора бромистого этидия и
перемешивают (примечание: бромистый этидий является сильным мутагеном,
поэтому все манипуляции с ним и с агарозным гелем выполняют в
перчатках);
- проведение электрофореза: полученный раствор агарозы заливают в
кювету для геля согласно инструкции к прибору для горизонтального
электрофореза;
- для создания стартовых лунок в кювету помещают гребенку с
зубцами, полимеризация агарозы происходит при температуре ниже +42
град.C в течение 10 - 20 мин.;
- после застывания агарозы осторожно вынимают гребенку и
переносят гель в камеру для проведения электрофореза, в камеру
заливают 1 x ТАЕ буфер так, чтобы толщина слоя жидкости над гелем
составляла приблизительно 5 мм;
- вносят в лунки агарозного геля по 12,5 мкл амплифицированных
образцов, подключают к камере источник постоянного тока и проводят
электрофорез при напряжении 120 В в течение примерно 20 мин., помещая
стартовые лунки ближе к катоду;
- вынимают гель из камеры, переносят его на стекло
трансиллюминатора, включают трансиллюминатор и просматривают гель с
последующей видео- или фотодетекцией результатов. Фотоотпечатки или
оттиски, выполненные на лазерном принтере с разрешением не менее 600
точек на дюйм, прикладывают к протоколу проведения испытаний.
3.21. Интерпретацию результатов ПЦР проводят следующим образом:
- в положительном контрольном образце ДНК должна выявляться
полоса красно-оранжевого цвета, соответствующая по размеру
специфическим фрагментам селективных маркеров ГММ;
- в отрицательном контрольном образце полоса красно-оранжевого
цвета должна отсутствовать;
- наличие в анализируемом материале полосы красно-оранжевого
цвета, располагающейся строго на уровне полосы положительного
контрольного образца ДНК, свидетельствует о наличии в исследуемом
образце соответствующего селективного маркерного гена ГММ. При
отсутствии такой полосы результат считают отрицательным;
- наличие полосы красно-оранжевого цвета в отрицательном
контрольном образце, располагающейся на уровне полосы положительного
контрольного образца ДНК, считают результатом контаминации.
|
Фрагмент документа "О НАДЗОРЕ ЗА ОБОРОТОМ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ, СОДЕРЖАЩИХ ГМО".