МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. ОБЩИЕ ВОПРОСЫ. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ И ОПАСНОСТИ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ. Методика. Главный государственный санитарный врач РФ. 10.02.02 МУ 1.2.1105-02

Фрагмент документа "МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. ОБЩИЕ ВОПРОСЫ. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ И ОПАСНОСТИ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ".

Предыдущий фрагмент <<< ...  Оглавление  ... >>> Следующий фрагмент

Полный текст документа

4. Первый этап изучения токсичности
                 и опасности дезинфицирующих средств

     4.1. Сбор   информации  по  токсичности  и  опасности  по  данным
литературы согласно вышеуказанным параметрам токсичности проводится по
каждому ДВ и по всем компонентам,  входящим в ДС (состав средства),  с
учетом физико-химических свойств (молекулярной массы,  летучести,  pH,
растворимости,   степени   чистоты)   и   существующих   гигиенических
нормативов  в  различных  средах.  Пути  поступления  в  организм   ДС
определяются его назначением (обработка поверхностей,  предметов ухода
за больными,  изделий медицинского назначения, посуды, белья, игрушек,
санитарно-технического оборудования и т.д.).
     4.2. Определение среднесмертельной дозы  (ЛД  )   проводят    при
                                                 50
разных путях поступления в организм ДС в острых опытах [4].
     При внутрижелудочном  пути  используют 4 - 6 доз в геометрической
прогрессии,  но не менее 3.  Максимально вводимый объем мышам - 1  мл,
крысам и морским свинкам - 5 мл.
     При введении в брюшную полость, под кожу или в кровеносные сосуды
интервал  между  дозами  составляет 10 - 20 мг/кг или в геометрической
прогрессии  от  минимальной  дозы.  Максимальный   объем   для   мышей
составляет  0,5  мл,  для  крыс - 1 - 1,5 мл,  для кроликов - 10 мл на
килограмм массы тела.
     При нанесении  на  кожу  используют  нативный  ДС и в разведении.
Исследуемое ДС наносят в строго дозированных количествах из расчета на
1 кг массы тела и 1 кв.  см поверхности кожи (у мышей площадь на спине
составляет 2 x 2 см,  для крыс - 4 x 4 см,  время экспозиции 2 и  4  ч
соответственно). Животных помещают в специальные домики.
     Срок наблюдения за животными - до 3 недель.
     Допускается определение  ЛД   ускоренным методом  "одной   точки"
                                   50
по Ван  Дер Вардену при условии экспертной оценки известных соединений
или композиций.
     В ходе  опыта  регистрируются  клинические  признаки   отравления
животных,  сроки гибели и макроморфологические изменения в органах при
вскрытии погибших животных.
     Результаты изучения  острой  токсичности  оценивают  по 4 классам
опасности   согласно   классификации   по   ГОСТ    12.1.007-76    для
внутрижелудочного введения и нанесения на кожу (см. Прилож. 2).
     Для парентерального введения (под кожу  или  в  брюшную  полость)
полученные  результаты  оценивают по классификации К.К.  Сидорова (см.
Прилож. 3).
     4.3. Местно-раздражающее  действие  на кожу оценивают на кроликах
или  морских  свинках  с  однократным   и   многократным   (повторным)
воздействием  (10  -  12  аппликаций).  Животные отбираются со светлой
кожей.  Шерсть стригут накануне нанесения,  избегая порезов и  ссадин.
Площадь нанесения для кроликов 8 x 9 см,  для морских свинок 4 x 5 см.
Дезинфицирующее  средство  наносят  как  в  нативном  виде,  так  и  в
разведениях  с определением порога   острого   раздражающего  действия
(Lim      ). Время экспозиции составляет до 2 ч. В конце  эксперимента
    ac.sp.
ДС смывается (см.  Прилож. 4 и 4-а - формы протоколов опытов). Реакция
кожи регистрируется сразу после окончания экспозиции и далее ежедневно
в   течение   14   дней   наблюдений   (см.   Прилож.   5).   Отмечают
функционально-морфологические нарушения кожи (эритема,  отек, трещины,
изъязвления, некроз, сухость, шелушение и др.).
     Оценка эритемы  проводится   в   баллах   согласно   общепринятой
классификации С.В. Суворова.
     Объективным методом оценки отека кожи  служит  измерение  толщины
кожной  складки (в мм) при помощи инженерного микрометра и переводится
в баллы.  Баллы суммируются для каждого подопытного  животного,  после
чего   вычисляется   средний   суммарный   балл   для   данной  группы
экспериментальных животных [5].
     Выраженность местно-раздражающего  действия  испытуемого  ДС  при
однократной  аппликации  на  кожу   оценивается   в   соответствии   с
классификацией, разработанной для ДС (табл. 1).

                                                             Таблица 1

               КЛАССИФИКАЦИЯ ОПАСНОСТИ ПО ВЫРАЖЕННОСТИ
             МЕСТНО-РАЗДРАЖАЮЩИХ СВОЙСТВ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ
                           СРЕДСТВ НА КОЖЕ

------------------------------------------------------------------
| Выраженность раздражающего |Средний суммарный балл|   Классы   |
|          действия          |выраженности эритемы и| опасности  |
|                            |    величины отека    |            |
|----------------------------|----------------------|------------|
|Резко выраженное            |       более 6        |     1      |
|----------------------------|----------------------|------------|
|Выраженное                  |      4,1 - 6,0       |     2      |
|----------------------------|----------------------|------------|
|Умеренное                   |      2,1 - 4,0       |     3      |
|----------------------------|----------------------|------------|
|Слабое или отсутствие       |       0 - 2,0        |     4      |
------------------------------------------------------------------

      За порог  раздражающего  действия  ДС  на  кожу  принимается его
минимальное разбавление,  вызывающее  минимальный  эффект  у  животных
(определяют  для  веществ,  относящихся  к  1  -  3 классам по степени
выраженности раздражающего действия  на  кожу).  Регистрируется  также
минимальное разбавление вещества, не вызывающее раздражения кожи.
      4.4. Местно-раздражающее  действие  на  глаза  ДС  оценивают  на
кроликах (статистическая группа 3) или морских свинках (статистическая
группа  6).  Отмечают  выраженность  гиперемии  и  отека  конъюнктивы,
инъекцию  сосудов  склеры,  состояние  роговицы  и  радужной оболочки,
количество и качество выделений из глаза (см. Прилож. 6 и табл. 2).

                                                             Таблица 2

              ОЦЕНКА ИНТЕНСИВНОСТИ МЕСТНО-РАЗДРАЖАЮЩЕГО
                      ДЕЙСТВИЯ СРЕДСТВА НА ГЛАЗА

---------------------------------------------------------------------
|А|    Покраснение (века) и бульбарная конъюнктива (не    | Оценка  |
| |      затрагивающая роговицу и радужную оболочку)      | (баллы) |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Состояние сосудов нормальное                          |    0    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Сосуды явно расширены больше нормы                    |    1    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Разлитая гиперемия, отдельные сосуды трудноразличимы  |    2    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Дуффузная ярко-красного цвета гиперемия               |    3    |
|-|-------------------------------------------------------|---------|
|Б|                        Отек век                       |         |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Отека нет                                             |    0    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Слабый отек (включая мигательную перепонку)           |    1    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Явный отек и частичное выворачивание века             |    2    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Отек, веки наполовину закрылись                       |    3    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Отек, веки закрыты более чем наполовину или полностью |    4    |
| | закрылись                                             |         |
|-|-------------------------------------------------------|---------|
|В|                       Выделения                       |         |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Выделений нет                                         |    0    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Минимальное количество в углу глазной щели            |    1    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Количество выделений с увлажнением век и шерсти,      |    2    |
| | прилегающей к векам                                   |         |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Количество выделений с увлажнением век и шерсти и     |    3    |
| | значительной площади вокруг глаз                      |         |
|---------------------------------------------------------|---------|
|                     Сумма баллов (А + Б + В)            |         |
|---------------------------------------------------------|---------|
|                             Роговица                    |         |
|---------------------------------------------------------|---------|
|А|   Помутнение - степень плотности (участок наибольшей  | Оценка  |
| |                       плотности)                      | (баллы) |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Помутнения нет                                        |    0    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Рассеянное или диффузное, детали радужной оболочки    |    1    |
| | хорошо видны                                          |         |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Хорошо различимые полупрозрачные участки, детали      |    2    |
| | радужной оболочки слегка замутнены                    |         |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Участок с замутнением, детали радужной оболочки не    |    3    |
| | видны, размер зрачка едва различим                    |         |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Непрозрачная, радужная оболочка не видна              |    4    |
|-|-------------------------------------------------------|---------|
|Б|               Площадь поражения роговицы              |         |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Одна четверть (или менее), но более нуля              |    1    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Более одной четверти, но менее половины               |    2    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Более половины, но менее трех четвертей               |    3    |
| |-------------------------------------------------------|---------|
| | Более трех четвертей, но менее всей площади           |    4    |
|---------------------------------------------------------|---------|
|                       Сумма баллов (А + Б)              |         |
---------------------------------------------------------------------

     Результаты обследования    каждого   животного   суммируются,   и
выносится заключение о степени и характере поражения глаз при действии
на  него  изучаемого  соединения  или  средства.  Указывается характер
конъюнктивита (поверхностный,  глубокий),  наличие кератита.  Класс по
раздражающему  действию  ДС  оценивается по классификации выраженности
раздражающих свойств (табл. 3).

                                                             Таблица 3

                            КЛАССИФИКАЦИЯ
                 ПО ВЫРАЖЕННОСТИ РАЗДРАЖАЮЩИХ СВОЙСТВ
                   ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ НА ГЛАЗА

------------------------------------------------------------------
|  Выраженность  |Средний суммарный балл (конъюнктива (А +|Классы|
| раздражающего  |       Б + В) + роговица (А + Б))       |      |
|    действия    |                                        |      |
|----------------|----------------------------------------|------|
|Резко выраженное|более 11                                |1     |
|----------------|----------------------------------------|------|
|Выраженное      |7 - 10                                  |2     |
|----------------|----------------------------------------|------|
|Умеренное       |4 - 6                                   |3     |
|----------------|----------------------------------------|------|
|Слабое          |1 - 3                                   |4     |
|----------------|----------------------------------------|------|
|Отсутствие      |0                                       |5     |
------------------------------------------------------------------

     4.5. Оценка ингаляционной опасности ДС  проводится  в  насыщающих
концентрациях  в  герметичных  емкостях  (типа эксикатора),  в которых
создаются условия свободного испарения  летучих  компонентов  средства
при  комнатной  температуре в течение суток или более в зависимости от
их свойств. Опыты ставят на мышах или на крысах статическим методом из
расчета  объема воздуха на одно животное в час:  для мышей - 2 л,  для
крыс - 5 - 7 л.  Экспозиция составляет 2 - 4 ч.  В  ходе  эксперимента
регистрируются клинические признаки отравления и время их появления, а
также  гибель   животных.   После   окончания   воздействия   животных
целесообразно   обследовать   по   показателям   общетоксического  или
специфического   действия.   Опасность    ингаляционного    отравления
характеризуется степенью проявления интоксикации (табл. 4).

                                                             Таблица 4

                            КЛАССИФИКАЦИЯ
                                                      20
            ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ПО СТЕПЕНИ ЛЕТУЧЕСТИ (С  )

------------------------------------------------------------------
|  Класс опасности  | Степень опасности и выраженность действия  |
|-------------------|--------------------------------------------|
|1 - чрезвычайно    |Насыщающая концентрация вызывает гибель     |
|опасное вещество   |                                            |
|-------------------|--------------------------------------------|
|2 - высокоопасное  |Насыщающая концентрация вызывает отчетливые |
|                   |проявления интоксикации, гибель отсутствует |
|-------------------|--------------------------------------------|
|3 - умеренно       |Насыщающая концентрация вызывает минимальные|
|опасное            |изменения интегральных показателей при      |
|                   |обследовании животных (пороговый уровень)   |
|-------------------|--------------------------------------------|
|4 - малоопасное    |Насыщающая концентрация не оказывает        |
|                   |токсического действия                       |
------------------------------------------------------------------

     4.6. Сенсибилизирующие свойства ДС определяют комплексом методов.
     Методом Алексеевой-Петкевич  на  морских свинках при внутрикожном
введении 50 - 200 мкг ДС с  последующими  (через  10  дней)  накожными
аппликациями   и   постановкой  проб  (кожной  и  конъюнктивальной)  и
аллергологических  тестов  с  клетками  крови   по   выбору   согласно
Методическим указаниям, 1993 - 1997 гг. [6, 7].
     По реакции гиперчувствительности  "замедленного"  типа  (ГЗТ)  на
мышах  массой  20  +/-  0,5 г при внутрикожной сенсибилизации ДС в ПАФ
(полном адъюванте Фрейнда) проводят согласно  Методическим  указаниям,
1992 г. [4]. Индекс реакции (ИР) вычисляют по формуле:

----------------------------------------------------------------------
|                           h  - h                                   |
|                            0    k                                  |
|                      ИР = ------- x 100%,                          |
|                             h                                      |
|                              k                                     |
----------------------------------------------------------------------

     где h   и  h   -  объем  (масса)  стопы  в  опыте   и    контроле
         0      k
соответственно, мм (мг).
     Достоверным считают значения ИР более 5%.
     Силу аллергенной   активности   оценивают  по  классификации  для
химических веществ (см. Прилож. 7) [6, 7].
     4.7. Мутагенный  эффект  ДС  оценивают  по показаниям ускоренными
методами:  микроядерным на ретикулоцитах костного мозга, в тесте Эймса
или на дрозофиле согласно Методическим рекомендациям [8, 9].

Фрагмент документа "МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. ОБЩИЕ ВОПРОСЫ. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ И ОПАСНОСТИ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ".

Предыдущий фрагмент <<< ...  Оглавление  ... >>> Следующий фрагмент

Полный текст документа