МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОДЕЛЬНЫХ ТЕСТОВ ЦИСТ ЛЯМБЛИЙ И ООЦИСТ КРИПТОСПОРИДИЙ ДЛЯ ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВОДООЧИСТКИ. Методика. Главный государственный санитарный врач РФ. 14.11.02 МУК 4.2.1174-02

4.1. Подготовка модельной жидкости

     Материалом для получения ооцист криптоспоридий могут быть фекалии
молодняка  домашних  животных (телят,  поросят и др.).  Материал может
быть получен на животноводческих комплексах и фермах.
     Методы исследования   фекалий  для  диагностики  криптоспоридиоза
представлены в МУК  4.2.735-99  (см.  п.  2.3)  и  работе  Т.В.  Бейер
"Лабораторная  диагностика  криптоспоридиоза  у детей" (Л.,  1987) и с
учетом работы с микроорганизмами III группы патогенности (см. п. 2.8).
     4.1.1. Получение очищенной взвеси ооцист криптоспоридий.
     Фекалии, их содержащие,  в количестве 3  -  5  г  (чайная  ложка)
помещают  в  центрифужные  пробирки  емкостью  30  -  50 мл и отмывают
изотоническим  раствором  хлорида  натрия  (0,85%)  путем   повторного
центрифугирования (3 мин. при 1500 об./мин.) до образования прозрачной
надосадочной жидкости,  которую осторожно удаляют путем  пипетирования
(прилож. 2 <*>, рис. 1 и 2).
     --------------------------------
     <*> Не приводится.

     4.1.2. Осадок заливают 30%-ным раствором сахарозы при t = 30 - 35
ЬC в количестве,  равном трем  объемам  осадка,  и  маркером  отмечают
верхний уровень жидкости.
     4.1.3. Проводят тщательное размешивание стеклянной  палочкой  или
пипеткой  и  центрифугируют  в  режиме 2000 об./мин.  в течение 5 мин.
После  центрифугирования  смеси  дают  отстояться  15  мин.  Затем  на
поверхность  флотанта осторожно наслаивают 10 - 15 мл дистиллированной
воды и очень осторожно с  помощью  стеклянной  палочки  эту  воду  над
раствором сахарозы (граница между сахарозой и водой отмечена маркером)
слегка помешивают, чтобы ооцисты, находящиеся в верхнем слое флотанта,
переместились  из  верхнего  слоя сахарозы в находящуюся над ней воду.
Эту  воду  затем  с  помощью  пипеточного   дозатора   отсасывают   до
отмеченного  маркером уровня и переносят в чистую пробирку емкостью 50
мл,  размешивают и центрифугируют  в  прежнем  режиме  до  образования
прозрачной  жидкости.  Промывку  ооцист  с  помощью  центрифугирования
повторяют не менее 4 раз.
     4.1.4. После   последнего   промывания   и  осторожного  удаления
надосадочной жидкости (пипетированием) оставшийся осадок  переносят  в
центрифужные  пробирки  емкостью  10  мл  и  центрифугируют  при  3000
об./мин.  в  течение  5  мин.  Надосадочную  жидкость  удаляют   путем
пипетирования,  а  образовавшуюся после всех манипуляций взвесь ооцист
используют в дальнейшей работе.
     4.1.5. Количественное  определение содержания ооцист в полученной
взвеси проводят аналогичным для цист лямблий путем  либо  подсчетом  в
камере Горяева.  Ооцисты подсчитывают в 20 прямоугольниках (полученное
число соответствует их содержанию в 2  куб.  мм),  сумму  умножают  на
50000 и получают содержание ооцист в 1 мл взвеси.
     Дальнейшую работу проводят в соответствии с  пунктами  3.2.2.1  -
3.3.