Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОДЕЛЬНЫХ ТЕСТОВ ЦИСТ ЛЯМБЛИЙ И ООЦИСТ КРИПТОСПОРИДИЙ ДЛЯ ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВОДООЧИСТКИ".
4.1. Подготовка модельной жидкости Материалом для получения ооцист криптоспоридий могут быть фекалии молодняка домашних животных (телят, поросят и др.). Материал может быть получен на животноводческих комплексах и фермах. Методы исследования фекалий для диагностики криптоспоридиоза представлены в МУК 4.2.735-99 (см. п. 2.3) и работе Т.В. Бейер "Лабораторная диагностика криптоспоридиоза у детей" (Л., 1987) и с учетом работы с микроорганизмами III группы патогенности (см. п. 2.8). 4.1.1. Получение очищенной взвеси ооцист криптоспоридий. Фекалии, их содержащие, в количестве 3 - 5 г (чайная ложка) помещают в центрифужные пробирки емкостью 30 - 50 мл и отмывают изотоническим раствором хлорида натрия (0,85%) путем повторного центрифугирования (3 мин. при 1500 об./мин.) до образования прозрачной надосадочной жидкости, которую осторожно удаляют путем пипетирования (прилож. 2 <*>, рис. 1 и 2). -------------------------------- <*> Не приводится. 4.1.2. Осадок заливают 30%-ным раствором сахарозы при t = 30 - 35 ЬC в количестве, равном трем объемам осадка, и маркером отмечают верхний уровень жидкости. 4.1.3. Проводят тщательное размешивание стеклянной палочкой или пипеткой и центрифугируют в режиме 2000 об./мин. в течение 5 мин. После центрифугирования смеси дают отстояться 15 мин. Затем на поверхность флотанта осторожно наслаивают 10 - 15 мл дистиллированной воды и очень осторожно с помощью стеклянной палочки эту воду над раствором сахарозы (граница между сахарозой и водой отмечена маркером) слегка помешивают, чтобы ооцисты, находящиеся в верхнем слое флотанта, переместились из верхнего слоя сахарозы в находящуюся над ней воду. Эту воду затем с помощью пипеточного дозатора отсасывают до отмеченного маркером уровня и переносят в чистую пробирку емкостью 50 мл, размешивают и центрифугируют в прежнем режиме до образования прозрачной жидкости. Промывку ооцист с помощью центрифугирования повторяют не менее 4 раз. 4.1.4. После последнего промывания и осторожного удаления надосадочной жидкости (пипетированием) оставшийся осадок переносят в центрифужные пробирки емкостью 10 мл и центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 5 мин. Надосадочную жидкость удаляют путем пипетирования, а образовавшуюся после всех манипуляций взвесь ооцист используют в дальнейшей работе. 4.1.5. Количественное определение содержания ооцист в полученной взвеси проводят аналогичным для цист лямблий путем либо подсчетом в камере Горяева. Ооцисты подсчитывают в 20 прямоугольниках (полученное число соответствует их содержанию в 2 куб. мм), сумму умножают на 50000 и получают содержание ооцист в 1 мл взвеси. Дальнейшую работу проводят в соответствии с пунктами 3.2.2.1 - 3.3. |
Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОДЕЛЬНЫХ ТЕСТОВ ЦИСТ ЛЯМБЛИЙ И ООЦИСТ КРИПТОСПОРИДИЙ ДЛЯ ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВОДООЧИСТКИ".