Фрагмент документа "ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. ПОРЯДОК СБОРА, УПАКОВКИ, ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНОГО АНАЛИЗА БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ОТ БОЛЬНЫХ (И УМЕРШИХ) ПАЦИЕНТОВ С ПОДОЗРЕНИЕМ НА ТЯЖЕЛЫЙ ОСТРЫЙ РЕСПИРАТОРНЫЙ СИНДРОМ (ТОРС)".
6. Порядок проведения лабораторных исследований
6.1. Лабораторные исследования с целью диагностики ТОРС следует
проводить у пациентов с респираторными заболеваниями тяжелого течения
и неясной этиологии при наличии следующего комплекса симптомов:
- фебрильная лихорадка (температура тела выше 38 град.C);
- кашель;
- затрудненное дыхание или дыхательная недостаточность;
- наличие характерных изменений на рентгенограмме грудной клетки;
- гиперферментемия;
- отсутствие эффекта от антибиотиков при их использовании по
принятой схеме.
6.2. Исследование секционного материала от умерших на наличие
вируса ТОРС проводят при:
- наличии данных, указывающих на сходство клинической картины
заболевания, приведшего к летальному исходу, с описанной в п. 6.1;
- невозможности исключения такой клинической картины в анамнезе и
наличии указаний о предшествовавшем посещении регионов, в которых
регистрировались случаи ТОРС. Список регионов, в которых
регистрировались случаи ТОРС, приведен в Приложении 2.
6.3. Первоочередному обследованию при наличии указанной
клинической симптоматики подвергаются лица, недавно посещавшие
регионы, в которых регистрировались случаи ТОРС.
6.4. Лабораторные исследования с целью диагностики ТОРС следует
проводить также у лиц без клинических проявлений заболевания при
наличии тесного контакта с подозреваемым на ТОРС больным.
6.5. Исследования проводят с использованием диагностических
тест-систем, разрешенных к применению в установленном порядке.
6.6. При обследовании пациента до 10 дня от начала заболевания
используют метод ОТ-ПЦР двукратно с интервалом 5 дней. Для повышения
результативности анализа методом ОТ-ПЦР необходимо исследовать как
минимум три вида клинического материала: мазок из носоглотки (или смыв
из носоглотки), мокроту и фекалии. Дополнительно также может быть
исследована плазма крови. Каждую пробу клинического материала
тестируют трехкратно.
При получении хотя бы одного положительного результата пробу
считают первично положительной. Дополнительное тестирование проб
методом ИФА в этом случае не проводят. Пробы материала и полученную
кДНК отправляют в референтную лабораторию.
При получении отрицательных результатов ОТ-ПЦР проводят
исследование методом ИФА с тестированием сывороток, взятых на 10, 20 и
30 дни заболевания. Результат считают положительным при выявлении
серо-конверсии или увеличении титра антител в фазе реконвалесценции не
менее чем в 4 раза по сравнению с острой фазой. При получении
положительного результата ИФА пробы клинического материала отправляют
в референтную лабораторию.
6.7. При начале обследования пациента после 10 дня заболевания
проводят параллельное исследование материала методом ОТ-ПЦР двукратно
с интервалом 5 дней и тестирование парных сывороток, взятых на 10, 20
и 30 дни заболевания методом ИФА.
При получении положительного результата при любом методе
исследования пробы клинического материала и полученную кДНК отправляют
в референтную лабораторию.
При получении двукратных отрицательных результатов ОТ-ПЦР с
интервалом в 5 дней и отрицательных результатах ИФА на 10, 20 и 30 дни
заболевания диагноз ТОРС может быть исключен.
6.8. Лабораторное обследование контактных лиц проводят на всем
протяжении инкубационного периода предполагаемого заболевания.
6.9. Секционный материал (ткани легкого, сегментарные бронхи,
кровь, образцы фекалий), собранный в кратчайшие сроки после
наступления смерти, тестируют методом ПЦР. Каждый вид секционного
материала тестируют трехкратно. В случае получения хотя бы одного
положительного результата пробу считают первично положительной и в
кратчайшие сроки направляют в референтную лабораторию с целью
подтверждения (верификации).
6.10. В референтной лаборатории пробу клинического (секционного)
материала, давшую положительный результат при первичном тестировании
методом ОТ-ПЦР, дополнительно трехкратно анализируют методом ОТ-ПЦР с
использованием тест-системы, использовавшейся при первичном скрининге.
Дополнительно желательно использование других тест-систем,
разрешенных к применению в установленном порядке (при их последующей
разработке), выявляющих фрагмент РНК коронавируса SARS CoV, отличный
от фрагмента РНК, выявляемого в первичном исследовании. При этом
аналитическая чувствительность дополнительно используемой тест-системы
должна быть не ниже чувствительности тест-системы, используемой для
первичного скрининга.
При выявлении хотя бы одного положительного результата анализа на
этапе верификации пробу клинического (секционного) материала,
депонированную в референтной лаборатории, передают в ЦСДЛ для
проведения вирусологического исследования. Полученную в ходе
исследования кДНК отправляют в Центр молекулярной диагностики
инфекционных заболеваний для подтверждения результатов анализа методом
ОТ-ПЦР и секвенированием ДНК. Образцы кДНК следует хранить в
замороженном виде при -20 град.C и транспортировать в термоконтейнерах
с охлаждающими элементами или термосе со льдом при температуре 2 - 8
град.C.
При получении положительных результатов в ОТ-ПЦР целесообразно
проведение подтверждающего тестирования методом ИФА парных сывороток,
взятых на 10, 20 и 30 дни заболевания. Исследования проводят с
использованием диагностических тест-систем, разрешенных к применению в
установленном порядке. При получении положительного результата ИФА
пробы сывороток передают в ЦСДЛ.
6.11. Центр специальной лабораторной диагностики и лечения особо
опасных и экзотических инфекционных заболеваний и Центр молекулярной
диагностики инфекционных заболеваний докладывают о результатах
проводимых на их базе исследований в Минздрав России.
|
Фрагмент документа "ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. ПОРЯДОК СБОРА, УПАКОВКИ, ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНОГО АНАЛИЗА БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ОТ БОЛЬНЫХ (И УМЕРШИХ) ПАЦИЕНТОВ С ПОДОЗРЕНИЕМ НА ТЯЖЕЛЫЙ ОСТРЫЙ РЕСПИРАТОРНЫЙ СИНДРОМ (ТОРС)".