Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ АВЕРСЕКТИНА С (СМЕСИ ИЗОМЕРОВ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ".
9.3. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади
пика авермектина B1a (в условных единицах) от количества массы (мкг)
авермектина B1а в хроматографируемом объеме пробы, устанавливают по
методу абсолютной градуировки с использованием градуировочных
растворов, которые готовят согласно табл. 2. Градуировочные растворы
устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.
Таблица 2
РАСТВОРЫ
ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ
ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ КОНЦЕНТРАЦИИ АВЕРМЕКТИНА B1А
-----------------------------------------------------------------------
|N |Стандартный |Этиловый |Концентрация |Содержание |
| |раствор N 2 |спирт, куб. см |вещества, |вещества в |
| |авермектина | |мкг/куб. см |хроматографируем |
| |B1a, куб. см | | |ом |
| | | | |объеме пробы, |
| | | | |мкг |
|------|--------------|---------------|-------------|-----------------|
|1 |0 |25 |0 |0 |
|------|--------------|---------------|-------------|-----------------|
|2 |1,0 |24,5 |0,141 |0,0040 |
|------|--------------|---------------|-------------|-----------------|
|3 |1,5 |23,5 |0,211 |0,0060 |
|------|--------------|---------------|-------------|-----------------|
|4 |2,5 |22,5 |0,352 |0,0102 |
|------|--------------|---------------|-------------|-----------------|
|5 |5,0 |20,0 |0,704 |0,0201 |
|------|--------------|---------------|-------------|-----------------|
|6 |10,0 |15,0 |1,408 |0,0404 |
|------|--------------|---------------|-------------|-----------------|
|7 |20,0 |5,0 |2,816 |0,0804 |
-----------------------------------------------------------------------
Для построения градуировочного графика отбирают по 2,0 куб. см
каждого градуировочного раствора, помещают в центрифужные пробирки и
упаривают досуха на вакуумном испарителе. В каждую пробирку с сухим
остатком вносят по 0,5 куб. см ацетонитрила, пробирку энергично
встряхивают и обрабатывают ультразвуком в течение 30 с. Затем пробирку
повторно встряхивают и повторно обрабатывают ультразвуком. В каждую
пробирку вносят по 0,05 куб. см 1-метилимидазола. Пробирку закрывают,
тщательно перемешивают содержимое в течение 5 - 10 с, обрабатывают
ультразвуком, центрифугируют и помещают в холодильник при 0 ёC на 10
минут. После охлаждения в пробирку с образцом вносят 0,15 куб. см
охлажденной реакционной смеси. Пробирку закрывают и выдерживают в
холодильнике в течение 1 часа. Общий объем раствора пробы после
проведения реакции - 0,7 куб. см.
Растворы помещают в пробоотборное устройство хроматографа.
Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых
проб:
состав элюента метиловый спирт :
дистиллированная вода, 98:2
скорость потока элюента 2,0 куб. см/мин.
объем вводимой пробы 10 куб. мм
длины волн флюоресцентного
детектора 365/470 нм
Время удерживания авермектина B1в 9,7 мин.
B1a 12,2 мин.
На полученной хроматограмме измеряют площадь пика с помощью
интегратора хроматографа (в условных единицах) при анализе 6-и
растворов разных концентраций и растворителя, проводя не менее 5-и
параллельных определений для каждого раствора, и строят градуировочную
кривую зависимости площади пика авермектина B1a от количества
компонента в пробе (в мкг).
Проверку градуировочного графика проводят при изменении условий
анализа, но не реже 1 раза в неделю.
|
Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ АВЕРСЕКТИНА С (СМЕСИ ИЗОМЕРОВ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ".