ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ ПРИ ИССЛЕДОВАНИЯХ МЕТОДОМ ПЦР МАТЕРИАЛА, ИНФИЦИРОВАННОГО ПАТОГЕННЫМИ БИОЛОГИЧЕСКИМИ АГЕНТАМИ III - IV ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. Методика. Министерство здравоохранения РФ. 04.03.04 МУ 1.3.1888-04

8. Оценка и контроль качества работы ПЦР-лаборатории

     8.1.  В  ПЦР-лаборатории,  проводящей работы с ПБА III - IV групп
патогенности,    проводят    внутрилабораторный    контроль   качества
дезинфекции,  исследование  смывов  с рабочих поверхностей и воздушной
среды боксов.
     8.2.   В  ПЦР-лаборатории  проводят  внутрилабораторный  контроль
качества   ПЦР-исследований.   ПЦР-лаборатория  принимает  участие  во
внешнелабораторном  контроле качества деятельности генодиагностических
лабораторий.
     8.3.   Внутрилабораторный  контроль  проводят  с  периодичностью,
зависящей  от  объема  выполняемой работы и определяемой руководителем
лаборатории, но не реже одного раза в квартал.
     8.4.   Контроль   осуществляют   путем  исследования  шифрованных
аттестованных   контрольных   панелей,  содержащих  "положительные"  и
"отрицательные" пробы.
     8.5.  Количество проб зависит от объема проводимых исследований и
должно  быть  достаточным  для  оценки  работы сотрудников и выявления
контаминированных участков лаборатории.
     8.6.    Для    выявления   возможной   контаминации   лаборатории
нуклеиновыми   кислотами  контроль  проводят  путем  взятия  смывов  с
поверхностей. Смывы с поверхностей берут стерильными ватными тампонами
(зондами).  Перед  взятием смывов тампоны (зонды) смачивают стерильным
физиологическим  раствором  или  ТЕ-буфером  (10  mM Tris, 1 mM ЭДТА),
после  чего  вращательными  движениями  протирают рабочие поверхности.
После  взятия  смыва  зонд помещают в микропробирки типа "эппендорф" с
300  -  400  мкл  ТЕ-буфера,  вращают  в  течение  10  - 15 с, избегая
разбрызгивания  раствора, и, отжав избыток жидкости о стенки пробирки,
удаляют.
     Полученные суспензии центрифугируют при 8000 g (12000 об./мин.) в
течение   1   мин.   Надосадочную  жидкость  отбирают  наконечником  с
аэрозольным  барьером в микропробирку объемом 1,5 мл. Для выделения НК
используют 0,1 - 0,2 мл надосадочной фракции.
     8.7.  В  качестве  критериев оценки качества исследований методом
полимеразной   цепной   реакции  в  лаборатории  учитывают  результаты
внутреннего  и  внешнего  лабораторного  контроля,  а также отсутствие
случаев лабораторной контаминации нуклеиновыми кислотами.


                                                          Приложение 1

                                                          (справочное)