Фрагмент документа "ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ ПРИ ИССЛЕДОВАНИЯХ МЕТОДОМ ПЦР МАТЕРИАЛА, ИНФИЦИРОВАННОГО ПАТОГЕННЫМИ БИОЛОГИЧЕСКИМИ АГЕНТАМИ III - IV ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ".
4.2. Требования к помещениям ПЦР-лаборатории
4.2.1. Помещения ПЦР-лаборатории, проводящей работы с ПБА III -
IV групп патогенности, должны соответствовать требованиям СП
1.2.731-99 "Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп
патогенности и гельминтами".
4.2.2. Проведение исследований методом ПЦР с ПБА III - IV групп
патогенности допускается на базе действующих микробиологических
(бактериологических, вирусологических, иммунологических и др.)
лабораторий при условии соблюдения требований СП 1.2.731-99
"Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности и
гельминтами" и организации в лаборатории самостоятельных или
выделенных в составе других функциональных помещений рабочих зон,
соответствующих этапам ПЦР-анализа.
4.2.3. ПЦР-лаборатория должна включать следующий минимальный
набор рабочих зон:
- приема, регистрации, разбора и первичной обработки материала;
- выделения НК;
- приготовления реакционных смесей и проведения ПЦР;
- детекции продуктов амплификации методом электрофореза или ГиФА.
4.2.4. В ПЦР-лабораториях необходимо также предусмотреть наличие
вспомогательных помещений (комнаты ведения учетных документов или
ординаторской (комнаты персонала) <*>; кабинета заведующего
лабораторией <*>; раздевалки для сотрудников <**>; комнаты приема пищи
<**>; туалета <**>; подсобных (складских) помещений <**>).
------------------------------------
<*> Помещения могут быть объединены.
<**> Помещения могут быть общими с другими подразделениями
учреждения.
4.2.5. Необходимо наличие автоклавной комнаты для обеззараживания
исследуемого материала. Она может быть общей с другими подразделениями
учреждения при условии соблюдения требований биологической
безопасности.
4.2.6. Помещения для выполнения работ на этапах ПЦР-анализа
должны быть боксированными (боксы с предбоксами).
4.2.7. В зоне приема, регистрации, разбора и первичной обработки
материала проводят прием ПБА, пробоподготовку (сортировку, маркировку,
центрифугирование и др.), хранение и первичную инактивацию остатков
биоматериала дезинфицирующими средствами. Зону приема, регистрации,
разбора и первичной обработки материала располагают в комнате приема
материала или в отдельном боксированном помещении. Здесь же можно
проводить прием и обработку проб для исследования другими методами
(бактериологическими, вирусологическими, иммунологическими и т.д.),
при условии выделения отдельного оборудованного рабочего места для
ПЦР-анализа.
4.2.8. Зону выделения нуклеиновых кислот размещают в отдельном
помещении. При организации ПЦР-лаборатории на базе действующей
микробиологической лаборатории допускается выделение НК в помещениях,
в которых проводят другие виды исследований, кроме генно-инженерных
работ и работ по накоплению ПБА. В этом случае в помещении организуют
рабочую зону для выделения нуклеиновых кислот (НК), в которой
располагают ПЦР-бокс или бокс биологической безопасности. В ПЦР-боксе
(или боксе биологической безопасности) для выделения НК не допускается
проведение других работ.
4.2.9. В зоне приготовления реакционных смесей и проведения ПЦР
производят приготовление ПЦР-смеси, внесение в пробирку для ПЦР
выделенных препаратов ДНК или кДНК, обратную транскрипцию РНК и
амплификацию ДНК или кДНК. Помещение для приготовления реакционных
смесей и проведения ПЦР должно быть отдельным. Приготовление
реакционных ПЦР-смесей проводят в ПЦР-боксе.
4.2.10. При необходимости этап выделения НК может быть совмещен в
одном помещении с этапом приготовления реакционных смесей и проведения
ПЦР при наличии в нем отдельных ПЦР-боксов (боксов биологической
безопасности) - для подготовки реакционных ПЦР-смесей и для выделения
НК.
4.2.11. Зону детекции продуктов амплификации располагают в
отдельном помещении, по возможности оснащенном ПЦР-боксом.
4.2.12. При необходимости одновременного использования для
детекции продуктов амплификации метода электрофореза и метода
гибридизационного анализа следует выделить в помещении детекции
отдельную рабочую зону для проведения гибридизационного анализа. В
этом случае оборудование и принадлежности для каждого вида детекции
маркируют применительно к каждой зоне. Не допускается использовать для
проведения гибридизационного анализа пипетки и посуду, предназначенные
для электрофореза.
4.2.13. Планировочные решения и размещение оборудования должны
обеспечивать поточность движения исследуемого материала. Следует
полностью исключить воздухообмен между помещением детекции продуктов
амплификации и другими помещениями.
4.2.14. Лабораторию оборудуют водопроводом, канализацией,
электричеством и отоплением в соответствии с СП 1.2.731-99
"Безопасность работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности и
гельминтами". Все помещения лаборатории обеспечивают достаточным
естественным и искусственным освещением.
4.2.15. При строительстве новых или реконструкции имеющихся
ПЦР-лабораторий помещения оборудуют приточно-вытяжной или вытяжной
вентиляцией. Разница в давлении воздуха в помещениях ПЦР-лаборатории
достигается за счет различий в кратности воздухообмена в них.
Кратность воздухообмена должна соответствовать значениям, приведенным
в таблице.
----------------------------------------------------------------------
| Наименование помещения | Кратность воздухообмена |
| | (куб. м/ч) |
|--------------------------------------|-----------------------------|
| | приток | вытяжка |
|--------------------------------------|----------|------------------|
| Зона приема, регистрации, разбора и | 5 | 6 |
| первичной обработки материала | | |
|--------------------------------------|----------|------------------|
| Зона выделения нуклеиновых кислот | 5 | 6 |
| (НК) | | |
|--------------------------------------|----------|------------------|
| Зона приготовления реакционных | 5 | 5 |
| смесей и проведения ПЦР | | |
|--------------------------------------|----------|------------------|
| Зона детекции продуктов | 5 | 7 |
| амплификации | | |
----------------------------------------------------------------------
4.2.16. При необходимости в ПЦР-лаборатории могут быть
установлены кондиционеры в соответствии с СП 1.2.731-99 "Безопасность
работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности и гельминтами".
4.2.17. Внутреннюю отделку помещений выполняют в соответствии с
их функциональным назначением. Поверхности стен, пола и потолка в
лабораторных помещениях должны быть гладкими, без щелей, легко
обрабатываемыми, устойчивыми к действию моющих и дезинфицирующих
средств. Полы не должны быть скользкими.
4.2.18. Лабораторная мебель должна иметь покрытие, устойчивое к
действию моющих и дезинфицирующих средств. Поверхность столов не
должна иметь трещин и швов.
4.2.19. Помещения на всех этапах ПЦР-анализа оборудуют
бактерицидными лампами в соответствии с "Методическими указаниями по
применению бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха и
поверхностей в помещениях" N 11-16/03-06 от 28.02.95. Бактерицидные
лампы в помещениях ПЦР-лаборатории устанавливают из расчета 2,5
Вт/куб. м.
4.2.20. Помещения лаборатории должны быть непроницаемы для
грызунов и насекомых.
4.2.21. ПЦР-лабораторию обеспечивают средствами пожаротушения.
|
Фрагмент документа "ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ ПРИ ИССЛЕДОВАНИЯХ МЕТОДОМ ПЦР МАТЕРИАЛА, ИНФИЦИРОВАННОГО ПАТОГЕННЫМИ БИОЛОГИЧЕСКИМИ АГЕНТАМИ III - IV ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ".