Фрагмент документа "ДЕЗИНСЕКЦИЯ. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИНСЕКТИЦИДОВ, АКАРИЦИДОВ, РЕГУЛЯТОРОВ РАЗВИТИЯ И РЕПЕЛЛЕНТОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В МЕДИЦИНСКОЙ ДЕЗИНСЕКЦИИ".
3.1.9. Изучение кишечного действия инсектицидов
3.1.9.1. Метод группового кормления мух
Раствором инсектицида в 10%-ном сахарном сиропе (50 мл)
пропитывают кусочки ваты массой 1 г, которые размещают тонким слоем на
дне чашек Петри. При изучении веществ, нерастворимых в воде, готовят
10% спиртовой раствор, а затем разбавляют его сахарным сиропом до
нужной концентрации. Испытания инсектицидов проводят в концентрациях
0,001; 0,01; 0,1; 1,0%, в каждой не менее 3 повторностей. В марлевый
садок размером 20 x 20 x 20 см помещают чашку Петри с испытуемым
веществом (отравленной приманкой), в качестве альтернативной пищи
ставят сосуд с молоком. При изучении эффективности сухой сахарной
приманки (40 - 60% сахара) ее наносят на пластинки из стекла или
фанеры, которые помещают в садок. В опытах используют 30 мух обоего
пола 3 - 5-дневного возраста. За 12 ч до опыта в садках, в которых
выращивают мух, оставляют только воду. Контролем служат мухи,
питавшиеся молоком. Подсчет погибших мух проводят через 3, 24 и 48 ч.
Эффективность инсектицида определяют по числу мух, погибших в опытных
и контрольных садках (формула 5). Определяют концентрации, которые
обеспечивают 50, 95 или 99% гибели мух.
3.1.9.2. Метод группового кормления тараканов
Приготавливают растворы (эмульсии, суспензии) инсектицида в
подсолнечном масле или воде (в 4 - 5 концентрациях) и наносят по 1,5
мл на кусочки пшеничного хлеба размером 2 x 1 x 1 см. Опыты ставят
одновременно со всеми концентрациями, в 3 повторностях каждая. Хлеб,
смоченный инсектицидом, помещают на подложке из полиэтилена
(целлофана) в сосуд диаметром около 30 см и высотой около 10 см. Края
сосуда смазывают изнутри вазелином, чтобы предотвратить выползание
тараканов. В сосуд помещают по 30 насекомых (самки, самцы, личинки II
- IV возрастов) в соотношении 1:1:4. В качестве альтернативной пищи
кладут необработанный инсектицидом кусочек пшеничного хлеба и тампон,
смоченный водой. В контроле используют хлеб, смоченный растворителем
(масло, вода). Одновременно ставят контроль к биоматериалу.
Учет гибели тараканов проводят ежедневно в течение 5 суток.
Критерием оценки кишечного действия инсектицида является число
выживших насекомых через 5 суток от начала опыта в сравнении с
контролем (формула 5). Рассчитывают концентрации, вызывающие 50, 95
или 99% гибели насекомых.
3.1.9.3. Метод дозированного кормления насекомых
Метод предусматривает кормление насекомых из микропипетки с
оттянутым концом водными растворами (эмульсиями), приготовленными на
10%-ном сахарном сиропе. Метод позволяет точно регулировать количество
раствора, выпиваемого насекомыми, путем прерывания кормления в нужный
момент.
При постоянном объеме раствора (для комнатных мух - 0,01 мл,
рыжих тараканов - 0,05 мл) дозу инсектицида варьируют путем изменения
концентрации ДВ. Перед кормлением мух выдерживают без питания 12 ч,
тараканов - 2 суток. В контрольных опытах насекомых кормят сахарным
сиропом или растворителем. Опыты ставят в 3 повторностях для каждой
концентрации, в каждой повторности используют не менее 10 насекомых.
За процессом отмирания комнатных мух наблюдают в течение 1 суток,
тараканов - в течение 3 - 5 суток. Критерием оценки эффективности
инсектицида служит величина ЛД50(99), выраженная в мкг на одно
насекомое или в мкг на 1 г массы насекомого (формулы 3, 4).
3.1.9.4. Изучение ларвицидного действия инсектицидов по отношению
к личинкам комаров
В сосуды объемом 0,5 л (стеклянные сосуды, полистироловые или
парафинированные стаканы и т.п.) наливают по 249 мл водопроводной
воды, отстоянной в течение 24 ч. В каждый сосуд (за 2 ч до опыта)
помещают по 25 личинок III или начала IV возраста. Через 2 ч погибших
или ослабленных личинок удаляют и заменяют на жизнеспособных. В сосуды
добавляют 1 мл раствора (эмульсии, суспензии) инсектицида определенной
концентрации. Одновременно испытывают 4 - 5 концентраций, каждая в 3
повторностях. Контролем служат личинки, находившиеся в воде без
добавления инсектицида. Параллельно ставят контроль с эталонным
препаратом. В период эксперимента температура воды должна находиться в
пределах 21 - 23 град.C.
Подсчет погибших личинок проводят через 24 ч. Если более 10%
личинок в контроле окуклилось, опыт не учитывают и повторяют.
Испытания бактериальных препаратов проводят следующим образом: 50
мг препарата (порошок) помещают в 20 мл флакон, добавляют 10 мл
дистиллированной воды и 15 стеклянных шариков диаметром 6 мм.
Содержимое гомогенизируют 10 мин. в шейкере при скорости 700 ударов в
мин. Затем 0,1 мл гомогената смешивают с 9,9 мл дистиллированной воды.
Из этой суспензии делают последующие разведения. Для этого в сосуды,
содержащие 150 мл дистиллированной воды, добавляют 120, 90, 60, 30 и
15 мкл исходной суспензии, получая концентрации 0,04, 0,03, 0,02, 0,01
и 0,005 мг/л соответственно. В каждый сосуд подсаживают по 25 личинок
комаров начала IV возраста. Опыты проводят в 3 повторностях. В
контроле личинок помещают в дистиллированную воду. Опыты проводят при
температуре 23 - 27 град.C. Гибель личинок определяют через 24 и 48 ч.
По другой методике опыты проводят в чашках Петри с диаметром 80 -
100 мм, объем суспензии препарата - 50 мл. При разведении препарата
соседние концентрации отличаются в 4 раза (шкала с шагом 4). В каждый
сосуд помещают 20 личинок комаров II возраста и выдерживают при 27
град.C в течение 23 ч. Высчитывают эффективные концентрации,
обеспечивающие гибель 99 - 100% личинок.
|
Фрагмент документа "ДЕЗИНСЕКЦИЯ. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИНСЕКТИЦИДОВ, АКАРИЦИДОВ, РЕГУЛЯТОРОВ РАЗВИТИЯ И РЕПЕЛЛЕНТОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В МЕДИЦИНСКОЙ ДЕЗИНСЕКЦИИ".