ДЕЗИНСЕКЦИЯ. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИНСЕКТИЦИДОВ, АКАРИЦИДОВ, РЕГУЛЯТОРОВ РАЗВИТИЯ И РЕПЕЛЛЕНТОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В МЕДИЦИНСКОЙ ДЕЗИНСЕКЦИИ. Методика. Главный государственный санитарный врач РФ. 28.09.03 МУ 3.5.2.1759-03

2.1. Расчет дозировок и оценка токсичности препаратов

     Если  инсектоакарицидность  веществ для членистоногих неизвестна,
исследования  проводят  в  два  этапа, если же имеются ориентировочные
сведения  об  уровне инсектоакарицидности, исследования начинают сразу
со второго этапа.
     На   первом   этапе   для  испытания  готовят  серию  из  4  -  5
последовательных  10-кратных  разведений испытуемого вещества. Вначале
готовят исходный раствор (Cисх.) с концентрацией вещества, необходимой
для получения исследуемых концентраций ДВ.
     Расчет  концентрации  исходного  раствора  (эмульсии,  суспензии)
проводят по формуле:

             A x B
     Cисх. = -----,                       (1)
               C

     где:
     А - необходимая концентрация ДВ;
     В - необходимое количество раствора;
     С - концентрация ДВ в веществе.
     Пример 1. Из вещества, содержащего 90% ДВ, необходимо приготовить
100 мл раствора с концентрацией ДВ 0,3%.
     Cисх.  =  0,3  x  100  :  90  =  0,33  мл  (мг),  т.е. к 99,67 мл
растворителя необходимо добавить 0,33 мл испытуемого вещества.
     Пример  2.  Из  50%  концентрата  эмульсии необходимо приготовить
0,7%-ную водную эмульсию.
     Cисх. = 0,7 x 100 : 50 = 1,4 мл.
     В  том  случае,  если  необходимо  приготовить  раствор  заданной
концентрации  для  обработки  определенной площади так, чтобы получить
заданную дозировку, производят расчет по формуле 2:

                D x S
     Cисх. = ---------- x 100%,                (2)
             Cпреп. x V

     где:
     Cпреп. - концентрация ДВ в препарате;
     Cисх. - концентрация ДВ в исходном растворе;
     D - заданная дозировка;
     S - площадь обрабатываемой поверхности;
     V - объем препарата для обработки этой поверхности.
     Пример.  Нужно  получить  дозировку  (D)  величиной  0,1  г/м при
обработке диска из фильтровальной бумаги площадью (S) 78 кв. м (0,0078
кв.  м)  раствором  в  объеме  (V)  1  мл. Концентрация ДВ в препарате
(Cпреп.)  - 5% (0,05). Все показатели используют в одной размерности -
граммы   и   квадратные  метры  или  килограммы  и  гектары.  Проценты
обозначают десятичной дробью (5% = 0,05).
     Расчет: Cисх. = (0,1 x 0,0078) : (0,05 x 1) x 100% = 1,56%.
     То   есть  для  получения  исходного  (рабочего)  раствора  нужно
приготовить  1  мл  1,56%  раствора  препарата (развести в соотношении
1:63).
     Из  исходного  раствора  готовят серию 10-кратных разведений. Для
этого  к  1  мл  исходного  раствора  добавляют  9 мл растворителя и в
результате  получают  второе  разведение;  к  1  мл второго разведения
добавляют  9  мл  растворителя  и  получают третье разведение и т.д. В
нашем  примере  получаем  серию растворов, один мл которых на фильтрах
стандартного размера обеспечивает дозировки 0,1, 0,01, 0,001 г/кв. м и
т.д.
     На  втором  этапе  для  исследования препаратов за исходный берут
раствор с максимальным разведением, вызвавшим 100%-ную гибель особей в
опытах  первого  этапа,  и  исследуют  серию  растворов  с нисходящими
2-кратными разведениями.
     Для определения СД50(95, 99), СК50(95, 99) используют графический
способ  вычисления  этих показателей на пробит-логарифмической бумаге.
На  оси  абсцисс откладывают дозы ДВ (г/кв. м, мкг/г массы насекомого,
мг/особь)  или концентрации (%) в последовательных разведениях. На оси
ординат  -  %  гибели  насекомых при этих дозах (концентрациях). Между
полученными  точками  проводят  линию  регрессии. Для определения СД50
(СК50)  проводят  горизонтальную  линию на уровне 50% до пересечения с
линией  графика.  Опущенный  из точки пересечения перпендикуляр на ось
абсцисс  покажет  по  шкале  на  этой  оси  искомое  значение. Проводя
горизонтальную прямую на других уровнях и опуская перпендикуляр, можно
определить  соответствующие  другие  значения  СД  (СК),  например для
определения СД99 горизонтальную прямую до пересечения с линией графика
проводят на уровне 99% и т.д.
     Для  определения  массы  1  членистоногого до опыта взвешивают не
менее 10 анестезированных особей (обычно от 10 до 100 особей).
     Пересчет концентрации (%) в дозу (мкг/г массы членистоногого) при
использовании топикального метода нанесения проводят по формуле:

            A x Y x 10000
     СД50 = -------------,                   (3)
                  B

     где:
     A - концентрация СК50, %;
     Y - нанесенный объем, мкл;
     B - масса членистоногого, мг.
     Пересчет  величин  СД50(95,  99) (ЛД50(95, 99)) мкг на 1 мг массы
проводят по формуле:

                x
     ЛД50(99) = - x 1000,                    (4)
                y

     где:
     x - ЛД50(95, 99) на 1 насекомое в мкг;
     y - средняя масса 1 насекомого в мг.
     Среднюю величину гибели насекомых вычисляют по формуле:

         SUM V
     M = -----,
           n

     где:
     V - % гибели в каждом опыте;
     n - число повторностей;
     SUM - знак суммы.
     Для  оценки  степени  достоверности  средней  величины при данном
числе наблюдений используют формулу для подсчета ошибки средней:

             ___________
            /          2
           /SUM (V - M)
         \/------------
               n - 1
     m = ---------------,
                _
              \/n

     где:
     V - каждое измерение;
     M - среднее из всех измерений;
     n - число измерений;
     SUM - знак суммы.