ДЕЗИНСЕКЦИЯ. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИНСЕКТИЦИДОВ, АКАРИЦИДОВ, РЕГУЛЯТОРОВ РАЗВИТИЯ И РЕПЕЛЛЕНТОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В МЕДИЦИНСКОЙ ДЕЗИНСЕКЦИИ. Методика. Главный государственный санитарный врач РФ. 28.09.03 МУ 3.5.2.1759-03

3.1.1. Метод топикального нанесения инсектицидов

     Растворы  инсектицидов  (спиртовые  или ацетоновые) определенного
объема   с   помощью   микродозатора   наносят  на  среднеспинку  мух,
среднегрудь   клопов  и  тараканов.  В  качестве  микродозатора  можно
использовать   микрошприцы,   специальные  аппликаторы  или  петли  из
некорродирующей  проволоки.  Размер  капли  должен  быть  сопоставим с
размером   членистоногого,  но  не  должен  его  превышать.  Для  мух,
тараканов и клопов рекомендуется размер капель около 1 мкл.
     Петлю   можно   изготовить   самостоятельно  из  некорродирующего
материала   (платина,   держатель   спирали   в   электролампе)  путем
наматывания  на  иглу одного завитка. Форма петли должна быть круглой.
Затем в месте соединения петли и стержня делают изгиб под прямым углом
и   стержень   петли   прикрепляют   к  держателю  (микробиологический
держатель, цанговый карандаш и др.). Петлю калибруют путем перенесения
0,5  мл спирта из маленького стаканчика объемом 1 мл на фильтровальную
бумагу  с  подсчетом количества перенесенных капель. Опыт повторяют не
менее  3  раз.  Оптимальным  является  объем петли 1 мкл (0,5 мл = 500
капель).
     В  опыте  используют  не  менее  5 - 7 концентраций инсектицидов.
Параллельно  ставят  2 контрольных варианта: в первом на членистоногих
наносят  растворитель  без  инсектоакарицида,  во  втором  - насекомых
оставляют   без   обработки   (биоконтроль).  Все  опыты  ставят  в  3
повторностях, в каждой  по  20  особей.  В  период  проведения  опытов
температура  воздуха  в  помещении  должна  составлять 21 - 23 град.C,
относительная влажность - 55 - 60%.
     Насекомых после   нанесения   инсектицида  (растворителя)  и  его
высыхания  помещают  в  чистые  сосуды:  клопов   -   в   пробирки   с
фильтровальной  бумагой,  сложенной  "гармошкой";  мух и тараканов - в
стаканы. Тараканам дают пищу. Сосуды с насекомыми размещают в условиях
постоянной  температуры  (21  -  23  град.C)  и  освещенности  или при
комнатной температуре и естественной  освещенности.  Учет  результатов
опытов  для насекомых проводят через 1 сутки.  К живым относят особей,
способных к направленному передвижению,  а особей  неподвижных  или  с
резкими нарушениями координации - к мертвым. Если смертность насекомых
в контроле составляет более 5%, то в расчеты гибели необходимо вводить
поправку по формуле Аббота (6),  если смертность выше, то опыт бракуют
и повторяют снова, пытаясь выяснить причины неудачи в первом случае.
     При  проведении экспериментов используют не менее 5 концентраций,
которые  должны  вызывать  гибель  в интервале 0,1 - 99,9%. Полученные
результаты   обрабатывают   с  помощью  пробит-анализа,  строя  кривую
регрессии  "концентрация  -гибель"  или  "доза  -  гибель".  По кривой
регрессии  рассчитывают  показатели  СК50  (ЛД50),  СК95  (ЛД95), СК99
(ЛД99) (формулы 3, 4).
     При   указании   данных  по  летальным  концентрациям  или  дозам
необходимо  указывать  вид  насекомого  (при  возможности пол), стадию
развития, происхождение расы или популяции, температуру при проведении
экспериментов.  Наличие  таких  сведений  позволяет  сравнивать данные
разных экспериментаторов.
     Если перед началом исследований неизвестен диапазон концентраций,
вызывающих   100%-ную   гибель  объекта,  то  целесообразно  поставить
ориентировочный опыт с 10-кратным интервалом разведений.