ОБ УТВЕРЖДЕНИИ ПРАВИЛ И МЕТОДОВ
ИССЛЕДОВАНИЙ И ПРАВИЛ ОТБОРА ОБРАЗЦОВ ДОНОРСКОЙ
КРОВИ, НЕОБХОДИМЫХ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ И ИСПОЛНЕНИЯ ТЕХНИЧЕСКОГО
РЕГЛАМЕНТА О ТРЕБОВАНИЯХ БЕЗОПАСНОСТИ КРОВИ, ЕЕ ПРОДУКТОВ,
КРОВЕЗАМЕЩАЮЩИХ РАСТВОРОВ И ТЕХНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ,
ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В ТРАНСФУЗИОННО-ИНФУЗИОННОЙ ТЕРАПИИ
ПОСТАНОВЛЕНИЕ
ПРАВИТЕЛЬСТВО РФ
31 декабря 2010 г.
N 1230
(Д)
Правительство Российской Федерации постановляет:
Утвердить прилагаемые правила и методы исследований и правила
отбора образцов донорской крови, необходимые для применения и
исполнения технического регламента о требованиях безопасности крови,
ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств,
используемых в трансфузионно-инфузионной терапии.
Председатель Правительства
Российской Федерации
В. ПУТИН
31 декабря 2010 г.
N 1230
УТВЕРЖДЕНЫ
Постановлением Правительства
Российской Федерации
от 31 декабря 2010 года
N 1230
ПРАВИЛА И МЕТОДЫ
ИССЛЕДОВАНИЙ И ПРАВИЛА ОТБОРА ОБРАЗЦОВ ДОНОРСКОЙ
КРОВИ, НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ И ИСПОЛНЕНИЯ ТЕХНИЧЕСКОГО
РЕГЛАМЕНТА О ТРЕБОВАНИЯХ БЕЗОПАСНОСТИ КРОВИ, ЕЕ ПРОДУКТОВ,
КРОВЕЗАМЕЩАЮЩИХ РАСТВОРОВ И ТЕХНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ,
ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В ТРАНСФУЗИОННО-ИНФУЗИОННОЙ ТЕРАПИИ
1. Настоящий документ устанавливает правила и методы исследований
и правила отбора образцов донорской крови, необходимые для применения
и исполнения технического регламента о требованиях безопасности крови,
ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств,
используемых в трансфузионно-инфузионной терапии, утвержденного
Постановлением Правительства Российской Федерации от 26 января 2010 г.
N 29.
2. В настоящее время клинически значимыми при переливании крови и
ее компонентов являются группы крови по следующим системам:
система AB0, включающая антигены A, B;
система Резус, включающая антиген Резус-принадлежности класса D и
антигены эритроцитов C, c, E, e;
система Келл, включающая антигены эритроцитов класса K.
В норме у человека могут присутствовать указанные антигены и
антитела к антигенам системы AB0.
Переливание крови и (или) ее компонентов, а также беременность
могут способствовать появлению антиэритроцитарных аллоантител.
3. Требования безопасности крови и ее компонентов предусматривают
проведение исследований образцов донорской крови для определения групп
крови по системам AB0, Резус-принадлежности, а также для определения
фенотипа антигенов эритроцитов по системам Резус и Келл и скрининга
антиэритроцитарных аллоантител.
4. В целях обеспечения соблюдения требований безопасности крови и
ее компонентов необходимо использовать следующие иммунологические
методы:
а) метод агглютинации, основанный на слипании и выпадении в
осадок частиц (агглютинатов), корпускулярного антигена под
воздействием антител (агглютининов), - используется для определения
групп крови по системам AB0, Резус-принадлежности и фенотипа антигенов
эритроцитов по системам Резус и Келл, исследование может проводиться
как ручным способом (нанесение реагентов и образцов крови на плоскую
поверхность), так и с применением лабораторного оборудования (внесение
реагентов и образцов крови в гель, в микропланшеты, в микропланшеты с
магнитизированными эритроцитами, а также в колонки на стеклянных
микросферах);
б) метод гемагглютинации, основанный на способности эритроцитов с
адсорбированными антигенами или антителами агглютинироваться в
присутствии гомологичных сывороток или соответствующих антигенов с
образованием гемагглютинатов, - используется для определения
Резус-принадлежности, фенотипа антигенов эритроцитов по системам Резус
и Келл, скрининга антиэритроцитарных аллоантител, исследование
проводится в пробирках с помощью центрифугирования, а также с
применением лабораторного оборудования (внесение реагентов и образцов
крови в гель, в микропланшеты, в микропланшеты с магнитизированными
эритроцитами, а также в колонки на стеклянных микросферах).
5. В целях обеспечения соблюдения требований безопасности крови и
ее компонентов необходимо применять следующие правила исследования
групп крови:
а) определение группы крови по системе AB0:
группа крови по системе AB0 определяется перед каждым взятием у
донора крови или ее компонентов (далее - донация) с использованием
моноклональных антител специфичности анти-A, анти-B одной серии
реактивов;
повторное определение группы крови по системе AB0 проводится из
образца донорской крови, взятого во время донации перекрестным
способом со стандартными эритроцитами A, B;
допускается определение группы крови по системе AB0 в образцах
крови доноров плазмы без использования стандартных эритроцитов, если
ранее группа крови по системе AB0 определена дважды на образцах крови
каждого донора от разных донаций с использованием перекрестного
способа исследования со стандартными эритроцитами;
в каждую серию исследований включаются "положительный" и
"отрицательный" контрольные образцы (эритроциты A, B, 0 и плазма с
антителами специфичности анти-A, анти-B);
в случае расхождения результатов прямого и обратного определения
(выявление экстраагглютинина анти-A1), а также при ослаблении силы
реакции агглютинации при выявлении антигена A для диагностики
подгруппы антигена A используют реактив анти-A1;
выявление экстраагглютинина анти-A1 является основанием запрета
использования компонентов крови для лечебных целей;
б) определение группы крови по системе Резус:
Резус-принадлежность определяется наличием или отсутствием
антигена D, выявляемого при исследовании образца донорской крови,
взятого во время донации;
Резус-принадлежность устанавливается как положительная при
наличии антигена D и как отрицательная при отсутствии антигена D;
определение слабых вариантов антигена D () является обязательным
(доноры, имеющие слабый или частичный антиген D () считаются Резус
(D)-положительными);
типирование антигенов эритроцитов C, c, E, e системы Резус
является обязательным и производится дважды на образцах крови каждого
донора от разных донаций различными сериями типирующих реагентов или
различными методами. При совпадении результатов фенотип донора
считается установленным и при последующих донациях не определяется;
в каждую серию исследований включаются "положительный" и
"отрицательный" контроли (эритроциты D- и D+, C- и C+, E- и E+, e+ и
e-, c+ и c-).
6. В целях обеспечения соблюдения требований безопасности крови и
ее компонентов необходимо применять также следующие правила:
а) правила определения антигена эритроцитов K системы Келл:
исследуется у каждого донора двукратно во время разных донаций
различными сериями типирующих реагентов или различными методами;
при совпадении результатов K-принадлежность считается
установленной и при последующих донациях не определяется;
в каждую серию исследований включаются "положительный" и
"отрицательный" контроли (эритроциты K- и K+);
б) правила скрининга антиэритроцитарных аллоантител донорской
крови:
скрининг антиэритроцитарных аллоантител донорской крови
проводится у мужчин и женщин при каждой донации независимо от группы
крови системы AB0 и Резус (D)-принадлежности;
при скрининге антител выявляют клинически значимые антитела с
использованием панели стандартных эритроцитов, состоящей не менее чем
из 3 видов клеток, типированных по всем клинически значимым антигенам;
не допускается применение смеси (пула) образцов эритроцитов для
скрининга антиэритроцитарных аллоантител;
специфичность антител к антигенам эритроцитов устанавливается с
идентификационной панелью, состоящей не менее чем из 10 образцов
фенотипированных эритроцитов;
выявление антиэритроцитарных аллоантител является основанием для
запрета использования крови и ее компонентов в лечебных целях;
в каждую серию исследований включаются "положительный" и
"отрицательный" контроли (образцы сывороток, содержащие и не
содержащие антитела).
7. Отбор образцов донорской крови для определения групп крови
осуществляется во время донации непосредственно из системы для взятия
крови (емкость однократного применения, используемая для сбора крови и
ее компонентов) без нарушения целостности системы или из специального
контейнера-спутника для проб, имеющегося в составе этой системы, в
вакуумсодержащие (вакуумобразующие) одноразовые пробирки, содержащие
антикоагулянт этилендиаминтетрауксусная дикалиевая или трикалиевая
соль.
Пробирки с образцами крови после оседания эритроцитов (не ранее
чем через 30 минут после взятия крови) подвергаются центрифугированию,
режим которого должен соответствовать инструкции производителя
реагентов.
Не допускается открытие пробирок с образцами донорской крови до
момента доставки их на исследование в клинико-диагностическую
лабораторию.
Транспортировка в лабораторию пробирок с образцами крови
осуществляется в специальных контейнерах при температуре от +17 град.C
до +24 град.C при условии недопущения прямого воздействия света и
встряхивания.
8. В лечебных целях используется кровь и ее компоненты,
идентифицированные по системам AB0, Резус-принадлежности, фенотипу
антигенов эритроцитов по системам Резус и Келл и не имеющие клинически
значимых аллоантител к антигенам эритроцитов.
9. Безопасность донорской крови и ее компонентов должна
подтверждаться отрицательными результатами лабораторного контроля
образцов донорской крови, взятых во время каждой донации, на наличие
возбудителей гемотрансмиссивных инфекций.
10. В целях выявления маркеров вирусов иммунодефицита человека,
гепатитов B и C и возбудителя сифилиса необходимо использовать
следующие иммунологические и молекулярно-биологические методы:
а) иммунологические методы:
метод иммуноферментного анализа, основанный на выявлении
комплекса антиген-антитело с помощью фермента по изменению окраски
специфического субстрата, - используется для определения маркеров
вирусов иммунодефицита человека, гепатитов B и C и возбудителя
сифилиса;
метод иммунохемилюминесцентного анализа, основанный на выявлении
комплекса антиген-антитело при взаимодействии антигенов со
специфическими антителами, химически конъюгированными с люминофорами
(веществами, способными светиться в ультрафиолетовом свете) с
последующим измерением уровня свечения, - используется для определения
маркеров вирусов иммунодефицита человека, гепатитов B и C и
возбудителя сифилиса;
метод пассивной гемагглютинации, основанный на способности
эритроцитов с адсорбированными растворимыми антигенами
агглютинироваться в присутствии специфической иммунной сыворотки с
образованием гемагглютинатов, - используется для определения маркеров
возбудителя сифилиса;
метод преципитации, основанный на взаимодействии эквивалентных
количеств мелкодисперсных растворимых антигенов (преципитиногенов) с
соответствующими антителами (преципитинами) с образованием комплекса
антиген-антитело (преципитата) и последующим выпадением данного
комплекса в осадок, - используется для выявления неспецифических
антител к кардиолипиновому антигену при диагностике сифилиса;
б) молекулярно-биологические методы:
метод тестирования нуклеиновых кислот, основанный на обнаружении
специфичного участка генома возбудителя инфекции с помощью
многократного увеличения числа копий фрагмента нуклеиновых кислот, -
используется для определения нуклеиновых кислот вирусов иммунодефицита
человека, гепатитов B и C;
метод мультиплексного анализа, основанный на одновременном
обнаружении нуклеиновых кислот нескольких возбудителей инфекций, -
используется для определения нуклеиновых кислот вирусов иммунодефицита
человека, гепатитов B и C.
11. При определении маркеров вирусов иммунодефицита человека,
гепатитов B и C и возбудителя сифилиса необходимо соблюдать следующие
правила:
а) в отношении маркеров вирусов иммунодефицита человека и
гепатитов B и C:
образцы крови доноров исследуются на наличие антител к вирусу
иммунодефицита человека и антигена p24 вируса иммунодефицита человека
(одновременно), поверхностного антигена вируса гепатита B и антител к
вирусу гепатита C, а также неспецифических антител к кардиолипиновому
антигену и суммарных антител к возбудителю сифилиса;
допускается проведение исследования с целью одновременного
определения наличия антител к вирусу гепатита C и антигена вируса
гепатита C;
первое иммунологическое исследование на наличие маркеров вирусов
иммунодефицита человека, гепатитов B и C проводится в единичной
постановке;
при получении положительного результата анализа исследование
повторяют 2 раза с сохранением условий первой постановки, включая
реагенты;
в случае получения хотя бы одного положительного результата при
повторном тестировании на маркеры вирусов иммунодефицита человека
исследуемый образец донорской крови признается положительным и
подлежит направлению для подтверждающего исследования в лабораторию
специализированного учреждения для постановки лабораторного диагноза и
получения следующих заключений: антитела к вирусу иммунодефицита
человека и антиген p24 вируса иммунодефицита человека не определены,
неспецифическая или сомнительная серологическая реакция, инфекция,
обусловленная вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-инфекция);
при получении хотя бы одного положительного результата при
повторном тестировании на маркеры вирусов гепатита B и C исследуемый
образец донорской крови признается положительным и подлежит
исследованию в подтверждающем тесте для постановки лабораторного
диагноза;
б) в отношении маркеров возбудителя сифилиса:
при проведении первого тестирования на сифилис исследования
осуществляются в единичной постановке;
при получении положительного результата в любом из тестов
исследование повторяют 2 раза с сохранением условий первой постановки,
включая реагенты;
при получении положительного результата хотя бы в одной из двух
повторных постановок любого лабораторного теста образец донорской
крови признается положительным на сифилис.
12. Молекулярно-биологические исследования проводятся
дополнительно (до, после, одновременно) к обязательным
иммунологическим исследованиям на маркеры вирусов иммунодефицита
человека и гепатитов B и C и наиболее эффективны для обеспечения
безопасности компонентов крови с коротким сроком годности (менее 6
месяцев), а также для свежезамороженной плазмы, не прошедшей
карантинизацию. Указанные исследования проводятся для идентификации
конкретной нуклеиновой кислоты вирусов иммунодефицита человека,
гепатитов B и C, а также для установления общей составляющей указанных
нуклеиновых кислот (мультиплексный анализ) без дополнительной
идентификации нуклеиновой кислоты конкретного возбудителя инфекций с
соблюдением следующих правил:
первое молекулярно-биологическое исследование проводится в
единичной постановке;
при получении положительного результата исследование повторяют 2
раза с сохранением условий первой постановки, включая реагенты;
в случае получения хотя бы одного положительного результата при
повторном тестировании образец донорской крови признается
положительным;
подтверждение результатов молекулярно-биологических исследований
осуществляется на основании углубленного клинико-лабораторного
обследования доноров крови и ее компонентов.
13. Отбор образцов донорской крови для определения маркеров
вирусов иммунодефицита человека, гепатитов B и C и возбудителя
сифилиса осуществляется во время донации непосредственно из системы
для взятия крови (емкость однократного применения, используемая для
сбора крови и ее компонентов) без нарушения целостности системы или из
специального контейнера-спутника для проб, имеющегося в составе этой
системы, в вакуумсодержащие (вакуумобразующие) одноразовые пробирки,
соответствующие применяемым методикам исследований.
Не допускается открытие пробирок с образцами донорской крови до
момента доставки их на исследование в клинико-диагностическую
лабораторию.
Транспортировка в лабораторию пробирок с образцами осуществляется
в специальных контейнерах при температуре от +17 град.C до +24 град.C
при условии недопущения прямого воздействия света и встряхивания.
Пробирки с образцами крови после оседания эритроцитов или
отделения сгустка крови (не ранее чем через 30 минут после взятия
крови) подвергаются центрифугированию.
Для получения сыворотки или плазмы кровь подвергают
центрифугированию в течение 10 - 15 минут при ускорении 9810 - 11772
м/с2.
Повторное центрифугирование не рекомендуется.
Лабораторное исследование образцов донорской крови
иммунологическими методами для определения маркеров гемотрансмиссивных
инфекций проводится не ранее чем через 18 часов после взятия крови.
14. Клинико-диагностические лаборатории, осуществляющие
исследование образцов донорской крови, применяют методики, являющиеся
неотъемлемой частью реагентов, зарегистрированных в установленном
порядке в соответствии с законодательством Российской Федерации.
Методики исследований, интерпретация результатов должны
соответствовать инструкциям производителей реагентов и оборудования.
15. Деятельность клинико-диагностических лабораторий,
осуществляющих исследование образцов донорской крови в целях
обеспечения ее безопасности, организуется в соответствии со следующими
документами в области стандартизации:
ГОСТ Р ИСО 15189-2009 "Лаборатории медицинские. Частные
требования к качеству и компетентности";
ГОСТ Р ИСО 15198-2009 "Клиническая лабораторная медицина. Изделия
медицинские для диагностики in vitro. Подтверждение методик контроля
качества, рекомендуемых изготовителями пользователям";
ГОСТ Р 53133.3-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 3.
Описание материалов для контроля качества клинических лабораторных
исследований";
ГОСТ Р 53133.4-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 4.
Правила проведения клинического аудита эффективности лабораторного
обеспечения деятельности медицинских организаций";
ГОСТ Р 53079.1-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 1.
Правила описания методов исследований";
ГОСТ Р 53079.2-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 2.
Руководство по управлению качеством в клинико-диагностической
лаборатории. Типовая модель";
ГОСТ Р 53079.4-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4.
Правила ведения преаналитического этапа";
ГОСТ Р 53022.1-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 1.
Правила менеджмента качества клинических лабораторных исследований";
ГОСТ Р 53022.2-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 2.
Оценка аналитической надежности методов исследования (точность,
чувствительность, специфичность);
ГОСТ Р 53022.3-2008 "Технологии лабораторные клинические.
Требования к качеству клинических лабораторных исследований. Часть 3.
Правила оценки клинической информативности лабораторных тестов". |