Фрагмент документа "МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. ОБЩИЕ ВОПРОСЫ. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ И ОПАСНОСТИ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ".
6. Второй этап оценки токсичности и опасности
дезинфицирующих средств с учетом сферы применения
6.1. Цель этих исследований - дать токсикологическую
характеристику ДС и оценить реальную степень опасности в соответствии
с режимами использования и рекомендовать безопасные условия его
применения в практике.
6.2. В зависимости от способа обработки ДС оказывают на персонал,
проводящий дезинфекцию, ингаляционное воздействие в виде аэрозолей,
или аэрозолей и паров, или только паров.
Аэрозольная форма создается при орошении поверхностей растворами
ДС. При этом используется различная разрешенная для этих целей
аппаратура (гидропульт, дезинфаль, автомакс, распылители типа
"Росинка" и др.). Необходимо учитывать дисперсность аэрозольных
частиц, величину орошаемого факела.
Пары средства в воздухе образуются при использовании способа
"протирания", "погружения" или "замачивания".
6.3. Оценку ингаляционной опасности рабочих концентраций ДС или
готового к употреблению ДС проводят в затравочных камерах, моделируя в
статических условиях способы применения (орошение, протирание,
замачивание или погружение) с учетом режимов применения (нормы
расхода, экспозиции).
Как показал опыт работы с дезинфектантами, лимитирующими
эффектами для них являются - раздражающий, состояние нервной системы,
аллергические реакции. На основании проведенных исследований
определяют пороги острого и подострого действия (Lim и Lim ) по
ac. subac.
лимитирующему показателю и рассчитывают
зону острого токсического действия по отношению порога острого
действия к норме расхода (Lim / норма расхода) или зону подострого -
ac.
по отношению порога подострого действия к норме расхода (Lim /
subac.
норма расхода).
6.4. При моделировании способа протирания или орошения в
затравочной камере обрабатывают все боковые поверхности и пол в
рекомендуемой рабочей концентрации с учетом нормы расхода. В острых
опытах обработки проводятся однократно, а в подострых опытах -
ежедневно 5 раз в неделю, на протяжении всего эксперимента (от 2 до 4
недель).
При моделировании способа погружения или замачивания в
затравочную камеру объемом 1 куб. м помещают открытую емкость с
площадью открытой поверхности 0,1 кв. м (что составляет 10% от площади
затравочной камеры) с налитым в нее рабочим раствором ДС.
В затравочных камерах контролируют температуру и влажность
воздуха, определяют содержание летучих действующих веществ ДС.
6.5. В зависимости от вида дезинфекционных мероприятий проводится
дифференцированная оценка безопасности для персонала и пациентов:
- при заключительной дезинфекции, дезинфекции в очагах
инфекционных заболеваний, на предприятиях пищевой промышленности -
безопасность для персонала обеспечивается соблюдением гигиенических
нормативов летучих ДВ дезинфицирующих средств в воздухе рабочей зоны
(ПДК или ОБУВ);
- при текущей и профилактической дезинфекции - безопасность для
пациентов и персонала обеспечивается соблюдением общего гигиенического
норматива летучего ДВ в атмосферном воздухе (ПДК, ОБУВ - максимальная
разовая).
6.6. После проведенных лабораторных исследований по оценке
опасности при ингаляционном воздействии (аэрозоль + пары или пары)
проводят натурный эксперимент в помещении, моделирующем больничные
палаты или другие помещения (например, туалетные и ванные комнаты).
Обработка проводится в соответствии с рекомендуемыми режимами
(протирание или орошение) и нормами расхода. Воздух контролируют по
содержанию индикаторного летучего ДВ средства в сравнении с его
гигиеническим нормативом в воздухе рабочей зоны и максимально разовой
концентрацией в атмосферном воздухе. После окончания воздействия
проводится проветривание (естественное) до достижения гигиенического
норматива в атмосферном воздухе и рекомендуется режим проветривания.
При проведении натурного эксперимента по отработке режима
проветривания можно привлекать добровольцев с регистрацией в анкете
субъективных ощущений или жалоб.
6.7. Оценку ингаляционной опасности при однократном воздействии
проводят по зоне острого токсического действия согласно степени
ингаляционной опасности ДС (табл. 5), разрабатывают меры
предосторожности и рекомендуют соответствующие средства индивидуальной
защиты.
Таблица 5
КЛАССИФИКАЦИЯ СТЕПЕНИ ИНГАЛЯЦИОННОЙ ОПАСНОСТИ
ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ
------------------------------------------------------------------
|Класс опасности |Зона острого | Рекомендуемые условия |
| |токсического | применения |
| |действия: | |
| |отношение порога | |
| |острого действия | |
| |(Lim ) к норме | |
| | ac. | |
| |расхода | |
|----------------|-------------------|---------------------------|
|1 - высокоопасно| менее 1 |Использовать в |
| | |экстремальных ситуациях |
| | |(по эпидемиологическим |
| | |показаниям) в специальных |
| | |костюмах и противогазах |
|----------------|-------------------|---------------------------|
|2 - опасно | 1 - 3 |Использовать в ЛПУ со |
| | |средствами защиты органов |
| | |дыхания, глаз, кожи в |
| | |отсутствие больных и |
| | |пациентов |
|----------------|-------------------|---------------------------|
|3 - умеренно | 3,1 - 10 |Использовать в ЛПУ без |
|опасно | |средств защиты органов |
| | |дыхания и глаз, но в |
| | |отсутствие больных и |
| | |пациентов |
|----------------|-------------------|---------------------------|
|4 - малоопасно | более 10 |Использовать в |
| | |присутствии больных, |
| | |пациентов и в быту |
------------------------------------------------------------------
6.8. Оценку степени ингаляционной опасности ДС при подостром
воздействии проводят по зоне подострого действия (при Z менее
subac.
10 не рекомендуется использовать в присутствии больных, при Z
subac.
более 10 можно использовать в присутствии больных).
6.9. Для ДС, в состав которых входят нелетучие соединения, не
требуется проведение экспериментов с оценкой способов обработки
протиранием, погружением и замачиванием. Для них достаточна оценка
ингаляционной опасности в условиях насыщающих концентраций.
6.10. В том случае, когда средство рекомендуется использовать
способом орошения, следует проводить исследования, как указано выше.
6.11. Исследование кумулятивных свойств необходимо для
характеристики ДС при обработке посуды и игрушек. Используют метод
Лима. Исследования проводят в течение 24 +/- 4 дней. В первые 4 дня
вводят в желудок 0,1 ЛД , увеличивая дозы каждые 4 дня в полтора раза.
50
Коэффициент кумуляции рассчитывают по формуле:
n 1
ЛД / ЛД . Если К < 1, это указывает на кумулятивные свойства
50 50 кум
средства, а если К > 1 - на повышение резистентности организма
кум
на это соединение. Для ДС, обладающих кумулятивными свойствами,
необходимо определять остаточные количества ДС на обрабатываемых
объектах и отрабатывать режим отмыва от данного ДС [1].
6.12. Местно-раздражающее действие рабочих концентраций ДС
исследуют на кроликах или морских свинках при однократных и повторных
аппликациях в течение 14 дней. Состояние кожи регистрируется ежедневно
по наличию эритемы, отека, трещин, некроза, шелушения, сухости (см. п.
4.3 и Прилож. 7). При появлении первых признаков аппликации
прекращают. Кожно-резорбтивное действие в этом случае не изучается.
6.13. При отсутствии местно-раздражающего эффекта проводят
изучение кожно-резорбтивного действия рабочих растворов ДС на мышах
или крысах методом погружения хвостов в изучаемый раствор. Ежедневно
животные, помещенные в специальные домики, подвергаются воздействию
различных концентраций препарата, который налит в пробирки. Хвосты
животных погружают на 2/3 длины в раствор на время от 2 до 4 ч (в
зависимости от вида животных - соответственно мыши и крысы) на
протяжении 14 дней. Животных обследуют каждые 7 дней по различным
показателям, характеризующим состояние основных органов и систем
(нервной системы, печени, почек, сердечно-сосудистой системы и
периферической крови). Целесообразно использование дополнительных
специфических показателей, характерных для данного ДС.
Если в этот срок не выявлено резорбтивного эффекта ДС, то
дальнейшие исследования прекращают.
6.14. Местно-раздражающее действие рабочих концентраций ДС на
глаза проводят и оценивают, как в п. 4.4.
6.15. Для оценки безопасного использования столовой посуды после
обработки ДС проводят исследования его остаточных количеств на
поверхности. Для эксперимента используют комплект, состоящий из
тарелок (глубокой и мелкой), стакана или чашки, ложки и вилки. Посуду
погружают в дезинфицирующий раствор и выдерживают экспозицию согласно
рекомендованному режиму по ее обеззараживанию. Затем ДС смывают и на
посуде определяют остаточные количества ДС (по наиболее токсичному ДВ)
химико-аналитическим методом. Отрабатывают режимы отмыва посуды от ДС
(под проточной водой или путем кратного погружения в емкости с
питьевой водой) [14].
Полученные результаты сопоставляют с ПДК для ДВ в воде водных
объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования.
При этом учитывают, что только половина поверхности комплекта
контактирует с потребляемой пищей. Смывы с посуды оценивают по
местно-раздражающему действию на слизистые оболочки глаз и
цитотоксическому действию в культуре клеток, МУ, 1990 - 1996 гг.
(табл. 6). На основании полученных данных разрабатывается режим отмыва
посуды [15].
Таблица 6
ОЦЕНКА
ЦИТОТОКСИЧНОСТИ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ И СТЕРИЛИЗУЮЩИХ
СРЕДСТВ В ККЛ (ПРЯМОЙ КОНТАКТНЫЙ ТЕСТ)
НА ПРИМЕРЕ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА
------------------------------------------------------------------
| Концентрация | Реакция клеток в культуре <**> |
|раствора H2O2, % |----------------------------------------------|
| |степень| по Фармакопее | состояние клеток в |
| | ЦТД | США | культуре |
| | <*> |---------------| |
| | |степень|реакция| |
| | | ЦТД |клеток | |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|0,3% |++++ |4 |тяжелая|100%-ная деструкция |
| | | | |клеточного монослоя |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|0,15% |+++ |3 |умерен-|70 - 75% клеточного |
| | | |ная |монослоя содержит |
| | | | |округлые и/или |
| | | | |лизированные клетки |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|0,03% |++ |2 |мягкая |50% гибели клеток |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|0,015% |+ |1 |слабая |20 - 25% лизированных |
| | | | |клеток |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|0,007% |0 |0 |нет |Отсутствие ЦТД |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|Контроль наличия |++++ |4 |тяжелая|100%-ная деструкция |
|ЦТД - мертиолят | | | |клеточного монослоя |
|1:10000 | | | | |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|Контроль |0 |0 |нет |Отсутствие ЦТД |
|отсутствия ЦТД - | | | | |
|0,9%-ный раствор | | | | |
|хлористого натрия| | | | |
|-----------------|-------|-------|-------|----------------------|
|Интактная ККЛ |0 |0 |нет |Отсутствие ЦТД |
------------------------------------------------------------------
--------------------------------
<*> Согласно "Методическим указаниям по использованию культуры
диплоидных клеток человека, рекомендуемых для
токсиколого-гигиенических исследований". М., 1991, 23 с.
<**> Образец удовлетворяет требованиям безопасности, если ни одна
из опытных клеточных культур не имеет степень более 1.
6.16. Безопасность остаточных количеств ДС на ИМН оценивают
комплексом методов: пирогенность, цитотоксическое действие (далее -
ЦТД) в культуре клеток (далее - ККЛ), гемолитическое действие.
Проводится отработка режима отмыва ИМН от ДС [15 - 20].
Оценку смываемости ДС проводят с ИМН из разных материалов
(металлов, стекла, резин натуральных и силиконовых, пластмасс). Режим
отмыва ИМН осуществляют под проточной водой или при кратном погружении
в дистиллированную воду. Остаточные количества (вытяжку или смывы) ДС
с изделий получают дистиллированной водой при соотношении объема
изделий к объему воды 1:1. Приготовление вытяжек или смывов проводится
(в термостате) при температуре 37 ЬC в течение 24 ч. В полученные
вытяжки или смывы добавляют хлористый натрий и используют при оценке
пирогенности [17], гемолитического действия [18, 19] и ЦТД в культуре
клеток (диплоидные клетки человека - ДКЧ и клетки почек зеленых
мартышек - ПЗМ-4647) [15 - 17].
Вытяжки или смывы вносят в культуру клеток на 30 мин., затем
раствор сливают и клетки промывают. В качестве отрицательного контроля
берут клетки с питательной средой и клетки при воздействии
физиологического раствора, приготовленного на воде, используемой для
получения вытяжки. В качестве положительного контроля берут клетки
после воздействия раствором мертиолята (1:10000). Результаты оценивают
по ЦТД (см. табл. 6).
6.17. Сенсибилизирующее действие (см. п. 4.6).
При положительных результатах на первом этапе оценку аллергенного
действия ДС проводят при комплексном поступлении аллергена в организм
(через органы дыхания и кожу). Для этого используются эксперименты,
описанные в п. 6.4, при повторных ингаляционных воздействиях рабочих
растворов ДС. Тестирование проводят на 14 и 28 сутки от начала
воздействия, используя конъюнктивальную пробу как более чувствительную
при ингаляционном пути поступления в организм и 2 - 3 иммунологических
теста. Определяют Lim , который учитывают при определении зоны
sp.
подострого токсического действия.
При кожном пути поступления средств в организм исследования
проводят на морских свинках при повторных 4-недельных кожных
аппликациях ДС в концентрации, не вызывающей местно-раздражающего
действия. Тестирование проводят, как указано выше, добавляя кожную
пробу. При оценке результатов учитывают развитие сенсибилизации даже у
единичных животных в группе (см. Прилож. 6) [6, 7].
6.18. Для полной характеристики ДС на основе литературных данных
дается токсикологическая характеристика компонентов состава средства
(это вспомогательные компоненты-наполнители, стабилизаторы,
антикоррозионные, отдушки, красители и т.д.).
6.19. На основании проведенных исследований разрабатываются
рекомендации по мерам предосторожности при работе со средством и его
хранении, а также меры первой помощи при случайном отравлении.
|
Фрагмент документа "МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. ОБЩИЕ ВОПРОСЫ. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ И ОПАСНОСТИ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИХ СРЕДСТВ".