3.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ МИКРООРГАНИЗМОВ-ПРОДУЦЕНТОВ, БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ И ИХ КОМПОНЕНТОВ В АТМОСФЕРНОМ ВОЗДУХЕ НАСЕЛЕННЫХ МЕСТ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МЕТОДИКА ГЛАВНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ САНИТАРНЫЙ ВРАЧ РФ 6 июня 2001 г. N МУК 4.2.1054-01 (Д) УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.ОНИЩЕНКО 6 июня 2001 года Дата введения - 1 октября 2001 года 1. Общие положения и область применения Настоящие методические указания устанавливают методику проведения микробиологического количественного анализа концентраций промышленных микроорганизмов и бактериальных препаратов в атмосферном воздухе населенных мест в диапазоне от 100 до 5000 клеток в 1 куб. м воздуха. Методические указания разработаны с целью обеспечения микробиологического контроля концентрации промышленных микроорганизмов и бактериальных препаратов в атмосферном воздухе населенных мест и оценки соответствия уровня их содержания гигиеническим нормативам на основе учета требований ГОСТов 17.2.4.02-81 "Охрана природы. Атмосфера. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ" и 8.653-96. ГСИ "Методики выполнения измерений". Методические указания предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий биотехнологических предприятий, микробиологических лабораторий, научно-исследовательских институтов, работающих в области гигиены окружающей среды и аккредитованных в установленном порядке на право проведения микробиологических исследований. 2. Характеристика штамма микроорганизма 2.1. Таксономическое положение штамма. 2.2. Морфология колоний и клеток. (Данные по каждому штамму для п. п. 2.1, 2.2 представлены в табл.) 3. Пределы измерений Методика обеспечивает выполнение измерений количества клеток микроорганизма в воздушной среде в диапазоне концентраций от 10 до 5000 клеток в 1 куб. м воздуха при доверительной вероятности 0,95. 4. Метод измерений Метод основан на аспирации из воздуха клеток микроорганизма на поверхность плотной питательной среды и подсчете выросших колоний по типичным морфологическим признакам. 5. Средства измерений, оборудование, вспомогательные устройства, материалы При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства и материалы. 5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы ---------------------------------------------------------------------- | Прибор для бактериологического анализа воздуха, | | | модель 818 (щелевой прибор Кротова) | ТУ 64-12791-77 | |---------------------------------------------------|----------------| | Импактор микробиологический ИМБ-15 | | |---------------------------------------------------|----------------| | Прибор для бактериологического | | | анализа воздуха "Флора-100" | | |---------------------------------------------------|----------------| | Термостаты электрические суховоздушные | | | или водяные | | |---------------------------------------------------|----------------| | Автоклав электрический | ГОСТ 9586-75 | |---------------------------------------------------|----------------| | Бокс, оборудованный бактерицидными лампами | | |---------------------------------------------------|----------------| | Холодильник бытовой | | |---------------------------------------------------|----------------| | Весы лабораторные аналитические типа ВЛА-200 | | |---------------------------------------------------|----------------| | Микроскоп биологический с иммерсионной | | | системой типа "Биолам" Л-211 | | |---------------------------------------------------|----------------| | Лупа с увеличением 10 х | ГОСТ 25706-83 | |---------------------------------------------------|----------------| | Чашки Петри бактериологические плоскодонные | | | стеклянные диаметром 100 мм | | |---------------------------------------------------|----------------| | Пробирки биологические вместимостью 20 и 35 мл | ГОСТ 10515-75 | |---------------------------------------------------|----------------| | Пипетки мерные на 1, 5 и 10 мл | ГОСТ 10515-75 | |---------------------------------------------------|----------------| | Колбы конические вместимостью 250 и 500 мл | ГОСТ 1770-74 | |---------------------------------------------------|----------------| | Секундомер | ГОСТ 9586-75 | |---------------------------------------------------|----------------| | Барометр | ГОСТ 24696-79 | |---------------------------------------------------|----------------| | Марля медицинская | ГОСТ 9412-77 | |---------------------------------------------------|----------------| | Вата медицинская гигроскопическая | ГОСТ 25556-81. | ---------------------------------------------------------------------- 5.2. Питательные среды ---------------------------------------------------------------------- | Агар микробиологический | ГОСТ 17206-96. | ---------------------------------------------------------------------- Селективная среда (среда для каждого штамма микроорганизмов представлена в табл.). 6. Требования безопасности При выполнении измерений концентрации клеток в воздушной среде соблюдают следующие требования. Правила техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТу 12.1.005-88. Электробезопасность при работе с электроустановками по ГОСТу 12.1.019-79 и инструкции по эксплуатации прибора. Руководство "Положение об организации работы по технике безопасности в микробиологической промышленности" (1980), "Инструкции по устройству, требованиям безопасности и личной гигиены при работе в микробиологических лабораториях предприятий микробиологической промышленности" (1977). Все виды работ с реактивами проводят только в вытяжном шкафу при работающей вентиляции, работа с биологическим материалом осуществляется в боксе, оборудованном бактерицидными лампами. 7. Требования к квалификации операторов К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие соответствующую подготовку и имеющие навыки работы в области микробиологических исследований. 8. Проведение измерения 8.1. Условия отбора проб воздуха Для определения концентрации микроорганизма производят отбор проб воздуха при помощи аппарата Кротова со скоростью 10 л/мин. на поверхность плотной питательной среды. Время отбора пробы воздуха 20 мин. Аппарат Кротова перед каждым отбором пробы воздуха тщательно протирают спиртом. Особенно тщательно обрабатывают поверхность подвижного диска и внутреннюю стенку прибора, наружную и внутреннюю стенку крышки. На подвижной диск устанавливают подготовленную чашку Петри со средой, одновременно снимая с нее крышку. Прибор закрывают. Соприкосновение крышки прибора со средой недопустимо. После отбора пробы воздуха и остановки диска прибор открывают, быстро снимают чашку Петри и закрывают крышкой от данной чашки. На дне чашки Петри стеклографом отмечают точку контроля, время аспирации и дату отбора пробы. В том случае, если определяется концентрация микроорганизмов, имеющих обильный воздушный мицелий, отбор производят в жидкостные поглотители с последующим разведением и посевом на плотную питательную среду. 8.2. Выполнение анализа Метод предполагает учет количества типичных по морфологическим признакам колоний, выросших на 3 - 4 сутки после посева воздуха. Прямой метод позволяет учитывать на чашке до 200 колоний. Селективную среду тщательно перемешивают и разливают по 20 мл в стеклянные чашки Петри на горизонтальной поверхности. При необходимости в селективную среду добавляют компоненты, подавляющие рост посторонней микрофлоры. Чашки с застывшей средой помещают в термостат на сутки при температуре 37 ёС, после чего проросшие чашки бракуют, стерильные чашки используют для контроля воздуха. После отбора проб воздуха чашки Петри инкубируют в термостате и производят подсчет выросших типичных колоний. При необходимости культуру подвергают микроскопированию. 9. Вычисление результатов измерения Расчет концентрации клеток в перерасчете на 1 куб. м воздуха производят по формуле: N х 1000 Х = -------- кл./куб. м, V где: Х - концентрация клеток в воздухе; N - количество колоний, выросших на чашке; 1000 - коэффициент перерасчета на 1 куб. м воздуха; V - объем воздуха, л (произведение скорости на время аспирации). Для консорциумов микроорганизмов используют следующую методику подсчета: А = 100 х N / d, где: А - концентрация консорциума (КОЕ/куб. м); N - концентрация контрольного микроорганизма (КОЕ/куб. м); d - содержание контрольного микроорганизма в консорциуме (%). Контрольные микроорганизмы, входящие в состав консорциумов (препаратов, созданных на основе живых микроорганизмов и включающих в себя два и более штаммов), представлены в табл. с пометкой КМ, там же приведены торговые названия препаратов. Используемые сокращения и условные обозначения АС - Агаризованная среда МПА - Мясопептонный агар МСЭА - Агар с экстрактом мозга и сердца РНСП - Роды с неясным систематическим положением САС - Синтетическая агаризованная среда ВЗ - Выброс запрещен. Пояснение к таблице Микроорганизмы, сведения о которых представлены в табл., разделены на группы, не являющиеся формальными таксономическими категориями, но подразделяющие штаммы на легко определяемые фенотипические единицы. Таксономическое положение каждого штамма определено до уровня семейства за исключением т.н. "Родов с неясным систематическим положением" согласно "Определителю бактерий Берджи" (М., "Мир", 1997). Для каждого из штаммов микроорганизмов представлена селективная твердая питательная среда и специальные добавки в среду, необходимые для подавления посторонней микрофлоры. Колонка "Примечания" содержит сведения об особенностях штамма как упрощающих его идентификацию (способность к образованию какого-либо пигмента, специфическая ферментативная активность и т.д.), так и создающих возможность экспресс-диагностики. Таблица ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ И УСЛОВИЯ ИХ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- | N | ПДК | Таксономическое | Питательная | Добавки в | Условия | Морфологические | Примечания | | п/п| атм., | положение | среда | питательную | культивирования | признаки колоний | | | | кл./ | | (базовая) | среду для | (время | | | | | куб. м | | | подавления | инкубации | | | | | | | | посторонней | и t град.С) | | | | | | | | микрофлоры | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Грамотрицательные аэробные/микроаэрофильные палочки и кокки | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 1 | 50 | Семейство: | МПА | Спирт этиловый | 1 сутки | Круглые, с ровным краем, | | | | | Neisseriaceae | | рект. 2 мл/100 | 38 град.С | блестящие, бесцветные, d - | | | | | Род: | | мл среды | | 3 - 4 мм | | | | | Acinetobactor | | | | | | | | | Вид: oleovorum | | | | | | | | | superaffinicum | | | | | | | | | шт. ВСБ 712 | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 2 | 300 | Вид: species | МПА | Спирт этиловый | 3 суток | Округлые, гладкие, | | | | | шт. ВСБ 644 | | рект. 2 мл/100 | 37 град.С | слабовыпуклые, с ровным | | | | | | | мл среды | | краем, светлые, d - 3 мм | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 3 | 500 | Семейство: | Мясная вода / | Амфотерицин | 2 - 3 | Мелкие, выпуклые, плотные, | Синтезирует | | | | Azotobacteriaceae | МПА-1/1, | 10 мкг/мл | суток | маслянисто-блестящие, | водорастворимый | | | | Род: | пептон 10,0, | стрептомицина | 28 град.С | вросшие в агар | пигмент, | | | | Azotobacter | натрий | сульфат | | | флуоресцирующий в | | | | Вид: | хлористый 5,0, | 250 мкг/мл | | | УФ-лучах | | | | Vinelandii | глюкоза 10,0, | | | | | | | | (Lipman) | агар 2,0, рН | | | | | | | | шт. Ф.ч - 1 | 7,2 - 7,4 | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 4 | 200 | Семейство: | МПА | Нафталин | 2 суток | Полупрозрачные, глянцевые, | При добавлении | | | | Pseudomonaceae | | 2 мл/100 мл | 28 град.С | слегка опалесцирующие, в | нафталина - | | | | Род: | | среды | | центре небольшое | темно-коричневая | | | | Pseudomonas | | | | уплотнение в виде точки, d | окраска | | | | Вид: | | | | - 1,4 - 2,2 | | | | | fluorescens | | | | | | | | | шт. К3б | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 5 | 2000 | шт. ST | МПА | Фенол, ацетон, | 2 суток | Глянцевые, опалесцирующие, | | | | | | | стирол | 28 град.С | d - 2 мм | | | | | | | (2 мл/100 мл | | | | | | | | | среды) | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 6 | 30 | Вид: stutzeri | Картофельный | Низко- | 2 суток | Светло-серые, круглые, в | КМ, препарат | | | | шт. 367-1 | агар | молекулярные | 32 град.С | центральной части | "Деваройл" | | | | | | спирты (кроме | | угристые, бежевые, край | | | | | | | метанола) 2 | | волнистый прозрачный | | | | | | | мл/100 мл | | | | | | | | | среды | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 7 | 1000 | РНСП | САС с | Метанол | 3 суток | Выпуклые, гладкие, | | | | | Род: | метанолом | 2 мл/100 мл | 30 - 35 | сероватобелые, слизистой | | | | | Acetobacter | | среды (рН 4,5) | град.С | консистенции | | | | | Вид: | | | | | | | | | metnylicum | | | | | | | | | шт. ВСБ-924 | | | | | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Грамположительные палочки и кокки, образующие эндоспоры | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 8 | 200 | Семейство: | Различные | Амфотерицин В | 1 сутки, | Круглые, в центре | | | | | Bacillaceae | агаризованные | (10 мкг/1 мл | 30 - 37 | выпуклые, шероховатые, с | | | | | Род: Bacillus | среды (белково- | среды) либо | град.С | лопастным краем, | | | | | Вид: polymixa | витаминный | Полимиксин М | | желтовато-сероватого | | | | | шт. | агар, кукурузо- | | | цвета, d - 2 - 2,5 мм | | |----|--------|---------------------| пептонный | | | | | | 9 | 200 | шт. F-12 | агар) | | | | | |----|--------|---------------------| | | | | | | 10 | 1000 | Вид: Subtilis | | | | | | | | | шт. 265-76 | | | | | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Грамположительные неспорообразующие палочки правильной формы | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 11 | 2000 | Семейство: | Среда Рогози | Желчь | 7 - 8 | Мелкие, круглые колонии. | КМ препарата "Байкал" | | | | Lactobacillaceae | МПА | | суток | Глубинные колонии с | | | | | Род: | | | 30 град.С | выростами | | | | | Lactobacillus | | | | | | | | | Вид: cazei | | | | | | | | | шт. 21 | | | | | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Факультативные анаэробные грамотрицательные палочки | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 12 | ВЗ | Семейство: | Среда Эндо | Ампициллин | 1 сутки | Выпуклые, с блестящей | ГИЖ | | | | Enterobacteriaceae | | 200 мкг/1 мл | 27 град.С | поверхностью, ровными | | | | | Род: Esherihia | | среды | | краями, легко | | | | | Вид: coli | | | | эмульгирующие в солевом | | | | | шт. 1864 | | | | растворе, | | | | | | | | | непигментированные | | |----|--------|---------------------| | | | | | | 13 | ВЗ | шт. 472-Т23 | | | | | | |----|--------|---------------------| | | | | | | 14 | ВЗ | шт. ТДГ-6 | | | | | | |----|--------|---------------------| | | | | | | 15 | ВЗ | шт. 436 | | | | | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Актиномицеты и родственные микроорганизмы. Группа коринеформных бактерий | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Грамположительные неспорообразующие палочки неправильной формы | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 16 | 100 | Семейство: | Кровяной | | 7 - 14 | "Паукообразная" колония с | Отбор в жидкостный | | | | Actinomycetaceae | агар, МСЭА, | | суток | многочисленными | поглотитель | | | | Poд: | среда Гаррода | | | ветвящимися нитями | | | | | Actinomyces | | | | | | | | | Вид: rozeolus | | | | | | | | | шт. Z-219 | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 17 | 3000 | Семейство: | МПА | Грамицидин 10 | 3 суток | Желтоватого цвета с ровным | | | | | Corynebacteriaceae | | мкг/мл среды | 32 град.С | краем, d не более 5 мм | | | | | Род: | | | | | | | | | Corynebacterium | | | | | | | | | Вид: | | | | | | | | | glutamicum | | | | | | | | | шт. ВКПМ-В5115 | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 18 | 1000 | шт. ВСБ | МПА | Грамицидин 50 | 3 суток | Желтоватые или желтые с | | | | | 206-L | | мкг/мл | 32 град.С | ровным краем, d - 5 мм | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 19 | 5000 | Семейство: | Агар | | 3 суток | Серовато-белые или | Для роста нуждаются в | | | | Brevibacteriaceae | Хоттингера | | 32 град.С | кремовые, круглые, | тиамине | | | | Род: | | | | выпуклые, с ровным краем, | | | | | Brevibacterium | | | | влажно-блестящие, d - 3 мм | | | | | Вид: flavum | | | | | | | | | шт. ВНИИ | | | | | | | | | Генетика 50-72 | | | | | | | | | (ВКПМ-В37-57) | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 20 | ВЗ | Вид: | Агар | | 3 суток | Твердые, круглые, | | | | | lactofermentum. | Хоттингера | | 29 - 31 | кремового цвета | | | | | шт. НИТИА-89 | | | град.С | | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Нокардиоформные актиномицеты | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 21 | 200 | Семейство: | САС | Амфотерицин В 5 | 8 - 12 | Крупные, чашевидные или | Ускоренный метод | | | | Nocardiaceae | (Красильникова, | мкг/мл | суток 28 | плоские складчатые, | основан на | | | | Род: Nocardia | Гаузе 1) и | | град.С | крошащиеся. Воздушный | способности выделять | | | | Вид: <...> | органические | | | мицелий отсутствует. | рифамицин, который | | | | | АС | | | Растворимый пигмент на | образует зоны | | | | | | | | разных средах от | задержки роста | | | | | | | | зеленовато-бурого до | тест-культуры (St. | | | | | | | | ржавого или | Aureus 2093) | | | | | | | | красновато-коричневого | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 22 | 5000 | РНСП | АС Раймонда | Нефть или | 4 сут. | Оранжевые или | КМ препарата | | | | Род: | | нефтепродукты | 30 - 32 | ярко-оранжевые, круглые, | "Деваройл" | | | | Rhodococcus | | 2 мл/100 мл | град.С | выпуклые с ровным краем, | | | | | Вид: | | среды | | блестящие | | | | | eritropolis | | | | | | | | | шт. 367-2, | | | | | | | | | 367-6 | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 23 | 5000 | Вид: maris | Картофельный | Нефть или | 4 сут. | Ярко-оранжевые, круглые, | КМ препарата | | | | шт. 367-5 | агар | нефтепродукты | 30 - 32 | выпуклые с ровным краем, | "Деваройл" | | | | | | 2 мл/100 мл | град.С | блестящие | | | | | | | среды | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 24 | 5000 | Вид: ruber | Картофельный | | 4 сут. | Красные, круглые, | | | | | шт. 1418 (ВКМ | агар | | 30 град.С | выпуклые, слизистые | | | | | Ас 1513 D) 33 | | | | | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Актинопланы | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 25 | 25 | Семейство: | САС Гаузе 1 | Амфотерицин В | 10 - 12 | Черные, выпуклые, со | Черный или | | | | Micromonosporaceae | | 20 мкг/1 мл | сут. | складчатой поверхностью, d | темно-коричневый | | | | Род: | | среды | 37 град.С | - 3 - 5 мм, воздушного | пигмент | | | | Micromonospora | | сизомицин 2000 | | мицелия не образует | | | | | Вид: | | мкг/мл среды | | | | | | | atratavinosa | | | | | | | | | Sp. Nov. 1573 | | | | | | | | | шт. 184R | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 26 | 500 | Вид: purpurea | САС Гаузе 1 | Амфотерицин В | 10 сут. | Поднимаются круто от | Розовый или розоватый | | | | Var. Violacene | | 10 мкг/мл среды | 35 град.С | поверхности среды, хорошо | пигмент | | | | | | | | развит <...> мицелий | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Стрептомицеты и близкие к ним роды | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 27 | 500 | Семейство: | Среда | Амфотерицин В | 10 - 12 | Обильный воздушный мицелий | Отбор в жидкостный | | | | Steptomycetaceae | Хоттингера | 20 мкг/мл среды | сут. | серого цвета. Колонии | поглотитель | | | | Род: | | | 28 град.С | плоские, слабо складчатые, | | | | | Streptomyces | | | | с кратером в центре | | | | | Вид: | | | | | | | | | aureofaciens | | | | | | | | | шт. 0,19 (8) | | | | | | |----|--------|---------------------| | | |----------------------------|-----------------------| | 28 | 500 | шт. STR 2255 | | | | Округлые, выпуклые, серого | Отбор в жидкостный | | | | | | | | цвета, с хорошо развитым | поглотитель. | | | | | | | | воздушным мицелием, | Ускоренный метод - | | | | | | | | выделяют в среду темный | учет зон задержки | | | | | | | | пигмент | роста тесткультуры | | | | | | | | | Вас. Subtilis на | | | | | | | | | агаре Хоттингера | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 29 | 300 | Вид: | ISP на основе | Олеандомицин | 3 - 4 | Серо-белые, округлые, | Отбор в жидкостный | | | | cinnamonesis | агара Difco | или линкомицин | сут. | радиально-складчатые, с | поглотитель | | | | шт. НИЦБ 109 | | 15 мкг/мл среды | 28 град.С | фестончатым краем и | | | | | | | | | выпуклым более темным | | | | | | | | | центром | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 30 | 300 | Вид: eritreus | Среда ЭР-1 | Эритромицина | 10 - 14 | Колония с обильным | Отбор в жидкостный | | | | шт. 851 | | основание | сут. | воздушным мицелием, | поглотитель. | | | | | | (фосфат) | 32 град.С | труднофрагментируемым. | Ускоренный метод | | | | | | 250 - 500 | | Вегетативные гифы 0,5 - | основан на | | | | | | мкг/мл среды | | 2,0 мкм в диаметре | способности | | | | | | | | | продуцировать | | | | | | | | | антибиотик, который | | | | | | | | | определяется по | | | | | | | | | задержке зон роста | | | | | | | | | тесткультуры (Вас. | | | | | | | | | Subtilis 6633) | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 31 | 500 | Вид: | Среда Гаузе 1 | Амфотерицин В | 12 сут. | Округлые, плоские, d - 6 | Отбор в жидкостный | | | | kanamyceticus | | 10 мкг/мл среды | 28 град.С | мм. Воздушный мицелий | поглотитель. | | | | | | | | белый, обильный, | Ускоренный метод | | | | | | | | субстратный- | основан на | | | | | | | | светлокоричневый | способности | | | | | | | | | продуцировать | | | | | | | | | антибиотик, который | | | | | | | | | определяется по | | | | | | | | | задержке зон роста | | | | | | | | | тесткультуры Вас. | | | | | | | | | Subtilis АТСС 6683 | | | | | | | | | (споры) | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 32 | 500 | Вид: nourse; | Крахмально - | Амфотерицин В | 5 сут. | Белые, с раздельной | Отбор в жидкостные | | | | шт. 153/55 | аммиачная | 10 мкг/мл среды | 27 Сград. | складчатостью, приподнятым | поглотители | | | | | среда | | | центром, плоским волнистым | | | | | | | | | краем. Воздушный мицелий | | | | | | | | | серого цвета | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 33 | 300 | Вид: rimosus | АС с кукурузным | Амфотерицин В | 8 - 12 | Радиально-складчатые, в | Отбор в жидкостный | | | | шт. 1-43 | экстрактом | 20 мкг/мл среды | сут. | центре - кратер, | поглотитель. | | | | | и картофельным | | 27 град.С | субстратный мицелий - | Ускоренный метод | | | | | крахмалом | | | коричневый, воздушный - | основан на выделении | | | | | | | | светло-серый, хорошо | в среду антибиотика и | | | | | | | | развит | задержке зон роста | | | | | | | | | тесткультуры (Bac. | | | | | | | | | Subtilis вар. L2) | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 34 | ВЗ | Род: | САС | Неомицин, | 8 сут. | Небольшие обособленные, | Отбор в жидкостные | | | | Streptoverticillium | | лизоцим | 25 - 30 | дымка воздушного мицелия | поглотители. | | | | Вид: | | | град.С | бархатная или | Розовато-бежевый | | | | griseocameum | | | | хлопьевидная, розовато - | пигмент | | | | | | | | бежевого цвета с сиреневым | | | | | | | | | оттенком | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Микобактерии | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 35 | 2000 | Семейство: | Кукурузно - | | 7 сут. | Воздушного мицелия не | Возможно образование | | | | Mycobacteriaceae | мучной | | 35 - 40 | образует | пигмента | | | | Род: | глицериновый агар | | град.С | | | | | | Mycobacterium | | | | | | | | | Вид: species | | | | | | | | | шт. В 3805 | | | | | | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | Грибы и дейтеромицеты | |--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------| | 36 | 500 | Род: | АС/обрат, 1/1 | Стрептомицин | 9 - 11 | Выпуклые, правильно | Ускоренный метод | | | | Acrimonium | | 500 мкг/мл | суток | складчатые, белого цвета, | основан на | | | | Вид: | | среды | 28 град.С | с зубчатыми краями | способности выделять | | | | chrizogenum | | | | | протеазу, которую | | | | шт. 298-А | | | | | выявляют по | | | | | | | | | образованию зон | | | | | | | | | просветления среды | | | | | | | | | вокруг колоний | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 37 | 200 | Род: Candida | Сусло-агар | Дрожжевой | 2 - 3 | Однородные, гладкие, | При посеве по | | | | Вид: Famata | | гидролизат: | суток | белые, с ровным краем | трубочкам Эйнгорна с | | | | шт. ВСБ-641 | | Стрептомицин | 32 - 34 | | дрожжевой водой и | | | | | | 50 ЕД/1 мл | град.С | | глюкозой брожения нет | | | | | | среды | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 38 | 20 | Вид: | Картофельный | Нефтепродукты | 2 суток | Беловатые, матовые, | Отбор в жидкостные | | | | lipolitica | агар, МПА, | 2 мл/100 мл | 30 - 32 | плоские, край волнистый, | поглотители, КМ | | | | шт. 367-3 | сусло-агар, | среды | град.С | образует псевдомицелий | препарата "Деваройл" | | | | | минеральная | | | | | | | | | среда | | | | | | | | | Раймонда | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 39 | 100 | Вид: | Картофельный | | 3 сут. | Круглые, беловатые, на 3 - | Отбор в жидкостные | | | | tropicalis | агар САС | | 30 град.С | 4 день псевдомицелий | поглотители | | | | шт. ВСБ-928 | | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 40 | 100 | Вид: Utilis | Картофельный | | 2 суток | Белые, матовые, образует | Отбор в жидкостные | | | | шт. ВСБ-651 | агар, сусло- | | 30 град.С | псевдомицелий | поглотители | | | | | агар | | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 41 | 500 | Род: Fuzidium | Сусло-агар, | Амфотерицин В | 9 - 14 | Круглые, складчатые, | Ускоренный метод | | | | Вид: coccineum | среда N 9 | 10 мкг/мл среды | суток | серовато-розовые с белым, | основан на выделении | | | | шт. 108 | (ГФХ) | | 24 град.С | слегка фестончатым краем, | фузидиевой кислоты, | | | | | | | | мицелий выражен слабо | подавляющей рост | | | | | | | | | тест-культуры (Вас. | | | | | | | | | Myccides HB2) | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 42 | 500 | Род: | Агаризованная | Канамицин | 9 - 10 | Бежевые, складчатые, центр | Ускоренный метод | | | | Penicilium | среда Чапека, | 25 - 50 мкг/мл | суток | приподнят, края неровные, | основан на выделении | | | | Вид: | Райстрика | среды | 24 град.С | обратная сторона | бензилпенициллина, | | | | chrisogenum | | (неомицин, | | светло-коричневая | подавляющего рост | | | | | | сизомицин) | | | тест-культуры (St. | | | | | | | | | Aureus 209Р) | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 43 | 500 | Семейство: | Сабуро- | Карбенициллин | 4 - 5 | Округлые, складчатые, | | | | | Entomophtoraceae | декстрозный | 150 мкг/мл | суток | приподнятые к центру, | | | | | Род: | агар | среды, амфоте- | 25 град.С | серовато-кремового цвета | | | | | Entomophtora | | рицин - 10 мкг, | | | | | | | | | полимиксин М | | | | | | | | | 250 мкг | | | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 44 | 200 | Род: Pichia | Кукурузный | | 3 суток | Кремовато-серого цвета, | Отбор в жидкостные | | | | Вид: membrana | агар | | 30 - 34 | бархатистые, край | поглотители | | | | faciens | | | град.С | лопастной, поверхность | | | | | | | | | мучнистая, хорошо развитый | | | | | | | | | ветвящийся псевдомицелий | | |----|--------|---------------------|-------------------|-----------------|-------------------|----------------------------|-----------------------| | 45 | 500 | Род: | Сусло-агар | Карбенициллин | 4 - 5 | Круглые, с гладкой | Отбор в жидкостные | | | | Trichoderma | | 150 мкг/мл | суток | подошвой, слегка | поглотители. Выделяет | | | | Вид: | | среды | 28 - 30 | приподнятые над | ярко-желтый пигмент | | | | reesei шт. | | | град.С | поверхностью среды, край | | | | | NIBT 18.2-33 | | | | волнистый, образует | | | | | | | | | мицелий | | ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- |