Фрагмент документа "МЕТОДИКА КОМПЛЕКСНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ СЛЮНЫ, ПОТОЖИРОВЫХ ВЫДЕЛЕНИЙ, ВОЛОС И НОГТЕЙ ЧЕЛОВЕКА НА ПРИСУТСТВИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ НАРКОТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ (МОРФИНА, ГЕРОИНА И ЕГО МЕТАБОЛИТА 6-МОНОАЦЕТИЛМОРФИНА, КОДЕИНА, МЕТАДОНА, КОКАИНА, ФЕНЦИКЛИДИНА). МЕТОД".
2. Исследование волос и ногтей на присутствие
следовых количеств наркотических средств
Исследование остатков наркотических средств в отмытых от
посторонних примесей образцах волос и ногтей проводят методом
хромато-масс-спектрометрии при использовании режима электронного удара
при 70 эВ с последующим детектированием характеристических для
исследуемых веществ ионов.
2.1. Подготовка образцов к исследованию
Для удаления внешних загрязнений волосы и ногти отмывают 2N
раствором хлористо-водородной кислоты и метанолом (или этанолом) до
полного исчезновения в последнем растворителе (после его упаривания)
следов наркотического средства.
Присутствие исследуемых веществ определяют по описанной выше
методике хромато-масс-спектрального исследования, за исключением того,
что прибор работает в режиме регистрации характеристических для
исследуемых веществ или их трифторуксусных производных (далее
ТФА-производных) ионов. Времена удерживания и характеристические ионы
приведены в табл. 1.
По данной методике вещество считают идентифицированным при
совпадении времени удерживания всех характеристических ионов, а также
соотношения площадей их хроматографических пиков с аналогичными
показателями стандартного образца.
Количество исследуемых характеристических ионов для каждого
вещества определяется экспертом на основании выбранных им условий
хроматографирования и используемого оборудования. При проведении
экспертных исследований данное количество не может быть меньше 3.
Отсутствие одного хроматографического пика характеристического
иона в пределах 0,02 мин. времени удерживания при наличии всех других
пиков указывает на отсутствие данного соединения в пробе. На рис. 1
(не приводится) приведены хроматограммы характеристических ионов
кокаина, выделенного из волос проверяемого лица.
Таблица 1
ВРЕМЯ УДЕРЖИВАНИЯ И ХАРАКТЕРИСТИЧЕСКИЕ ИОНЫ
ИССЛЕДУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ <*>
--------------------------------
<*> Время удерживания стандартов может изменяться в зависимости
от используемых хроматографических условий.
------------------------------------------------------------------
| Вещество |Время удерживания,| Характеристические ионы, m/z |
| | мин. | |
|-------------|------------------|-------------------------------|
|Фенциклидин |9,31 |242, 200, 91, 186, 166 |
|-------------|------------------|-------------------------------|
|Метадон |10,02 |294, 72, 165, 223 |
|-------------|------------------|-------------------------------|
|Кокаин |10,94 |303, 182, 272, 198, 82 |
|-------------|------------------|-------------------------------|
|Кодеин ТФА |12,78 |395, 282, 338, 380 |
|-------------|------------------|-------------------------------|
|Морфин-2ТФА |12,96 |477, 364, 380, 69 |
|-------------|------------------|-------------------------------|
|6-МАМ ТФА |13,64 |423, 364, 311, 204 |
|-------------|------------------|-------------------------------|
|Морфин 2-Ас |14,41 |369, 327, 310, 268 |
------------------------------------------------------------------
Рис. 1. Хроматограммы характеристических ионов кокаина,
выделенного из волос проверяемого лица
Рисунок
----------------------------------------------------------------------
Не приводится.
Пределы обнаружения всех исследуемых веществ составляют 0,50 -
0,75 нг во вводимой пробе.
2.2. Методика получения трифторуксусных производных опиатов
Получение ТФА-производных проводят по следующей методике: после
удаления растворителя к сухому остатку экстракта добавляют 100 мкл
ангидрида трифторуксусной кислоты и нагревают при 80 ёС в течение 10
мин. После этого смесь охлаждают и упаривают в токе инертного газа или
воздуха. Сухой остаток растворяют в 50 - 250 мкл этилацетата.
2.3. Методики выделения веществ из волос и ногтей
Отмытые по приведенной выше методике волосы и ногти сушат при
комнатной температуре. Отбирают навеску 10 - 30 мг образца, которые
далее обрабатывают двумя методами.
Методика 1. Навески образцов заливают 1 - 3 мл метанола и
обрабатывают ультразвуком не менее 1 ч при проведении качественных
исследований и не менее 6 ч при количественном исследовании. После
этого жидкость сливают. Образцы промывают метанолом и объединенные
метанольные экстракты упаривают досуха.
Измельчение образцов в ступке пестиком с применением битого
стекла может ускорить процесс выделения исследуемых веществ. Однако
при этом также увеличивается выход соэкстрактивных веществ.
Методика 2. Навески разрушают в ступке пестиком с использованием
битого стекла. Полученные гомогенаты настаивают при постоянном
перемешивании при температуре 80 ёС с 1 мл 6N HCL в течение 6 ч. Затем
надосадочную жидкость отделяют от образцов. Оставшиеся образцы
промывают 1 мл дист. воды. Объединенные водные вытяжки подщелачивают
раствором аммиака до рН10 и экстрагируют 3 раза 2 мл смеси хлороформ -
изопропанол (9:1). Объединенные хлороформные вытяжки сушат над
безводным сульфатом натрия и упаривают досуха. Данная методика
приводит к гидролизу героина и его моноацетильных метаболитов до
морфина. В результате происходит увеличение чувствительности метода
исследования в целом при снижении его селективности.
Выбор методики проводится экспертом на основании анализа
обстоятельств дела и поставленных перед ним вопросов.
Пример типового заключения эксперта
Экз. N ____
КРИМИНАЛИСТИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ
----------------------------------------------------------------------
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ЭКСПЕРТА
N 2 Составлено 01.01.1997 г. Москва
Эксперты криминалистической лаборатории Семенов Анатолий Иванович
(образование высшее, специальность врач-лаборант, стаж экспертной
работы 16 лет) и Сидоров Александр Николаевич (кандидат химических
наук, стаж экспертной работы 18 лет) на основании постановления
заместителя начальника Управления по расследованию организованной
преступной деятельности МВД России полковника юстиции Жиглова И.А. от
9 декабря 1996 г. провели экспертизу по материалам уголовного дела N
13/1050.
На разрешение эксперта поставлен вопрос: имеются ли следы
наркотических средств в изъятых у Филиппова М.В. ногтевых срезах,
срезах волос, смывах с рук, лица и шеи, если да, то каких именно?
В распоряжение эксперта представлены ногтевые срезы и образцы
волос, упакованные в почтовый пакет, опечатанный печатью N 9 МВД
России, а также смывы с рук, лица и шеи, упакованные в почтовый пакет,
опечатанный печатью N 9 МВД России.
Внешний осмотр. На исследование объекты поступили в двух бумажных
почтовых пакетах голубого цвета, опечатанных печатями "С/Ч. МВД РФ. N
9" и заверенных подписями. На пакетах имелись надписи: "1. Образцы
волос. 2. Ногтевые срезы Филиппова M.B." и "Смывы с рук, с лица и шеи
Филиппова М.В." соответственно. Целостность пакетов и печатей в момент
поступления нарушена не была. При их вскрытии в них обнаружены:
прядь волос темного цвета, весом 0,249 г, длиной 4,5 см;
обрезки ногтей весом 0,047 г;
ватные тампоны в полимерных пакетах с надписями "смывы с рук" и
"смывы с лица и шеи".
Исследование
Исследование смывов (тампонов) с рук, лица и шеи
Исследование остатков наркотических средств на представленных
тампонах осуществляли методом тонкослойной хроматографии и методом
хромато-масс-спектрометрии.
Представленные на исследование тампоны замачивали в 75 мл этанола
в течение 4 ч. Затем спиртовые вытяжки фильтровали и упаривали досуха
на роторном испарителе при 40 ёС. Сухой остаток растворяли в 200 мкл
этанола. В качестве контроля использовали смывы с рук, лица и шеи
лабораторного персонала, полученные аналогичным способом.
Этанольные вытяжки в количестве 5 мкл наносили на
хроматографические пластины для высокоэффективной тонкослойной
хроматографии с Кизельгелем 60 F , производства фирмы "МЕРК"
254
(Германия), размером 10 x 10 см. Одновременно на пластины наносили
стандартные растворы 100 мкг/мл морфина, героина, кокаина и метадона в
этаноле. Хроматографирование проводили в системах:
- метанол - конц. аммиак (100:1,5),
- циклогексан-толуол-диэтиламин (75:15:10).
После удаления растворителя пластинки просматривали в УФ-свете
при лямбда = 254 и лямбда = 366 нм и обрабатывали реактивом
Драгендорфа (раствор висмута субнитрата и йодида калия в разбавленной
уксусной кислоте).
В результате проведенных исследований на хроматограммах смывов с
ладоней рук, лица и шеи Филиппова М.В. хроматографических зон,
совпадающих по значению Rf, поглощению в УФ-свете и характеру
окрашивания реактивом Драгендорфа с хроматографическими зонами
стандартных растворов морфина, героина, кокаина и метадона, не
-7
обнаружено (предел обнаружения метода составляет 10 г).
Исследование методом хромато-масс-спектрометрии проводили на
газовом хроматографе НР-5890 серии 2, оборудованном капиллярной
колонкой НР-1 с внутренним диаметром 0,25 мм и длиной 30 м. Для
обнаружения соединений использовали масс-селективный детектор HP-5970.
Все оборудование произведено фирмой "Хьюлетт Паккард". В качестве
газа-носителя применяли гелий со скоростью 1,4 мл/мин. Условия
хроматографирования: температура инжектора и интерфейса 240 и 280 ёС
соответственно; температура колонки программировалась от 100 до 270 ёС
со скоростью 20 ёС в мин. Пробу объемом 3 мкл вводили в колонку с
применением метода без деления потока газа-носителя. Масс-детектор
работал в режиме электронного удара при 70 эВ. Масс-спектры, снятые с
вершин хроматографических пиков, сравнивали по стандартной методике с
масс-спектрами библиотек "NBS75K" и "WILEY" производства фирмы
"Хьюлетт Паккард".
Вещество считалось идентифицированным при совпадении его
масс-спектра с библиотечным со значением коэффициента подобия более
90% и совпадении его времени удерживания со временем удерживания
стандарта идентифицированного вещества.
В результате проведенных исследований в смывах с ладоней рук,
лица и шеи Филиппова М.В., а также во всех контрольных смывах следы
наркотических средств не обнаружены (предел обнаружения метода
-9
составляет 10 г).
Комплексное исследование представленных образцов волос и ногтей с
целью обнаружения в них следовых количеств наркотических средств
проводили следующим образом:
а) исследование поверхности волос и ногтей на присутствие
наркотических средств;
б) удаление посторонних примесей с поверхности представленных
образцов;
в) исследование отмытых от посторонних примесей образцов.
Исследование поверхности волос и ногтей на присутствие
наркотических средств
Представленные на исследование образцы волос и ногтей настаивали
с этанолом в течение 4 ч. Затем спиртовые вытяжки фильтровали и
упаривали досуха на роторном испарителе при 40 ёС. Сухой остаток
растворяли в 50 мкл этанола. В качестве контроля использовали смывы с
образцов волос и ногтей лабораторного персонала, полученные
аналогичным способом.
Далее исследовали полученные экстракты методами тонкослойной
хроматографии и хромато-масс-спектрометрии, как описано выше.
В результате проведенных исследований в смывах с поверхности
волос и ногтей Филиппова М.В., а также во всех контрольных смывах
следовые количества наркотических и сильнодействующих средств не
-9
обнаружены (предел обнаружения метода составляет 10 г).
Удаление посторонних примесей с поверхности волос и ногтей
Для удаления мешающих дальнейшему исследованию потожировых
выделений и прочих загрязнений волосы и ногти промывались. При этом
осуществляли приборный контроль за качеством проведения данной
операции.
Волосы и ногти Филиппова М.В., а также контрольные волосы и ногти
последовательно отмывали 2N раствором хлористоводородной кислоты и
метанолом. Операция проводилась однократно. Отсутствие исследуемых
веществ проверяли по описанной выше методике
хромато-масс-спектрального исследования, за исключением того, что
прибор работал в режиме регистрации характеристических ионов
фенциклидина, метадона, героина, кокаина и трифторуксусных производных
морфина (морфин-2ТФА) и 6-моноацетилморфина (6-МАМ-ТФА).
Получение трифторуксусных производных проводили по следующей
методике: после удаления растворителя к сухому остатку экстракта
добавляли 100 мкл ангидрида трифторуксусной кислоты и нагревали при 80
ёС в течение 10 мин. После этого смесь охлаждали и упаривали в токе
инертного газа. Сухой остаток растворяли в 50 мкл этилацетата. Время
удерживания и характеристические ионы приведены в табл. 2.
Таблица 2
ВРЕМЯ УДЕРЖИВАНИЯ И ХАРАКТЕРИСТИЧЕСКИЕ ИОНЫ
ИССЛЕДУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ
------------------------------------------------------------------
| Вещество |Время удерживания, мин.| Характеристические ионы, |
| | | т/г |
|------------|-----------------------|---------------------------|
|Фенциклидин |9,32 |242, 200, 91 |
|------------|-----------------------|---------------------------|
|Метадон |10,03 |294, 165, 72 |
|------------|-----------------------|---------------------------|
|Кокаин |10,93 |303, 272, 182 |
|------------|-----------------------|---------------------------|
|Морфин-2ТФА |12,95 |477, 364, 380 |
|------------|-----------------------|---------------------------|
|6-МАМ-ТФА |13,65 |423, 364, 311 |
|------------|-----------------------|---------------------------|
|Героин |14,40 |369, 327, 310 |
------------------------------------------------------------------
По данной методике вещество считали идентифицированным при
совпадении времени удерживания всех характеристических ионов и
соотношения площадей их хроматографических пиков с аналогичными
показателями стандартного образца.
Исследование отмытых от посторонних примесей волос и ногтей
Исследование следовых количеств наркотических средств в
представленных образцах волос и ногтей, отмытых от посторонних
примесей, проводили методом хромато-масс-спектрометрии после получения
трифторуксусных производных некоторых из исследуемых веществ.
Отмытые от посторонних примесей волосы и ногти сушили при
комнатной температуре и после этого разрушали в ступке пестиком с
использованием битого стекла. Полученные гомогенаты настаивали при
постоянном перемешивании и при повышенной температуре с метанолом в
течение 6 ч. Метанольные вытяжки отделяли от образцов и упаривали
досуха на роторном испарителе. Сухой остаток исследовали методом
хромато-масс-спектрометрии после обработки трифторуксусным ангидридом,
как описано выше. Результаты проведенных исследований приведены в
табл. 3.
Таблица 3
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ОБНАРУЖЕНИЮ НАРКОТИЧЕСКИХ
СРЕДСТВ В ВОЛОСАХ И НОГТЯХ ФИЛИППОВА М.В.
------------------------------------------------------------------
| Объекты | Исследуемые вещества |
|исследования |--------------------------------------------------|
| |фенциклидин |метадон|кокаин|морфин- |6-МАМ-|героин|
| | | | |2ТФА |ТФА | |
|----------------------------------------------------------------|
|Образцы Филиппова М.В. |
|----------------------------------------------------------------|
|Волосы |- |- |- |- |- |- |
|-------------|------------|-------|------|--------|------|------|
|Ногти |- |- |- |- |- |- |
|----------------------------------------------------------------|
|Контрольные образцы |
|----------------------------------------------------------------|
|Волосы |- |- |- |- |- |- |
|-------------|------------|-------|------|--------|------|------|
|Ногти |- |- |- |- |- |- |
------------------------------------------------------------------
Примечание: пропуск означает, что вещество не обнаружено.
Как следует из табл. 3, в отмытых от посторонних примесей
образцах волос и ногтей Филиппова М.В. следовые количества
наркотических средств: фенциклидин, метадон, кокаин, морфин и героин,
а также 6-моноацетилморфин - не обнаружены. Предел обнаружения метода
-10
составляет 10 г.
Исследования по обнаружению следовых количеств других
наркотических средств в отмытых от посторонних примесей образцах волос
и ногтей не проводились ввиду отсутствия утвержденных методик их
исследования.
Таким образом, в результате проведенных исследований на
поверхности рук, лица и шеи, волос и ногтей, а также в отмытых от
посторонних примесей образцах волос и ногтей Филиппова М.В. следовые
количества наркотических средств: кокаин, метадон, морфин,
фенциклидин, героин, а также 6-моноацетилморфин не обнаружены.
Объекты исследования израсходованы полностью.
Выводы
На поверхности рук, лица и шеи, волос и ногтей Филиппова М.В.
следовые количества наркотических средств не обнаружены.
В отмытых от посторонних примесей образцах волос и ногтей
Филиппова М.В. наркотические средства: фенциклидин, кокаин, метадон,
морфин, героин, а также 6-моноацетилморфин - не обнаружены.
Эксперты: (подписи)
"1" января 1997 г.
|
Фрагмент документа "МЕТОДИКА КОМПЛЕКСНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ СЛЮНЫ, ПОТОЖИРОВЫХ ВЫДЕЛЕНИЙ, ВОЛОС И НОГТЕЙ ЧЕЛОВЕКА НА ПРИСУТСТВИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ НАРКОТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ (МОРФИНА, ГЕРОИНА И ЕГО МЕТАБОЛИТА 6-МОНОАЦЕТИЛМОРФИНА, КОДЕИНА, МЕТАДОНА, КОКАИНА, ФЕНЦИКЛИДИНА). МЕТОД".