3.3.1. ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКА. ОСНОВНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К ВАКЦИННЫМ ШТАММАМ ТУЛЯРЕМИЙНОГО МИКРОБА. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. Не задано. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. 12.02.07 МУ 3.3.1.2161-07

5.10. Получение взвеси клеток селезенки

     Животных умерщвляют и извлекают селезенку.  Селезенку освобождают
от  прилежащих  тканей,  капсулы,  измельчают  в  охлажденном растворе
Хенкса без ионов кальция и магния и продавливают через стальное сито с
диаметром  пор  1  мм  (или селезенку взвешивают на торсионных весах и
осторожным раздавливанием в стеклянном гомогенизаторе  готовят  взвесь
клеток из расчета 1 мл среды 199 на 50 мг ткани селезенки). Полученную
суспензию фильтруют через нейлоновый фильтр. Содержание ядросодержащих
клеток  селезенки  определяют  с  использованием  раствора трипанового
синего.  На  основании  полученной  цифры  и  веса   селезенки   можно
рассчитать  абсолютное  количество  ядросодержащих клеток в селезенке.
0,5  мл  взвеси  спленоцитов   отмывают   5   мл   среды   199   путем
центрифугирования  в  течение  10 мин.  при 150 g,  надосадок удаляют,
осадок разводят средой 199 с 10%-ми сыворотки крупного рогатого  скота
и антибиотиками (100 ед./мл) до исходной концентрации.