Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПЛОДООВОЩНОЙ, ПЛОДОВО-ЯГОДНОЙ И РАСТИТЕЛЬНОЙ ПРОДУКЦИИ".
5. Санитарно-паразитологические методы исследования овощей,
фруктов, ягод, столовой зелени и трав
5.1. Исследование плодоовощной, плодово-ягодной и растительной
продукции на яйца гельминтов, цисты простейших
5.1.1. Объединенную пробу овощей, плодов, ягод, корнеплодов
закладывают в чистые широкогорлые стеклянные банки или эмалированные,
пластиковые емкости (типа кастрюль, мисок, кюветов), заполненные
водой, объемом 1,5 - 2,0 л (с таким расчетом, чтобы исследуемый
материал был полностью погружен в воду) и замачивают на 2 часа.
5.1.2. В течение этого времени емкость встряхивают периодически
вручную или на аппаратах для встряхивания (шейкерах) 5 - 10 мин.
5.1.3. Через 2 часа обмывают щетками или кисточками (зависит от
размера объекта и его поверхности). Плоды, овощи с шероховатой
поверхностью обмывают особенно тщательно. Столовую зелень тщательно
прополаскивают.
5.1.4. Затем исследуемые плоды, овощи, ягоды или зелень удаляют
из воды.
5.1.5. Промывную воду отстаивают 60 мин.
Надосадочную жидкость осторожно сливают в отдельную емкость и
исследуют по методике мембранной фильтрации питьевой и (или) сточной
воды в соответствии с МУК 4.2.964-00 "Санитарно-паразитологические
исследования воды хозяйственного и питьевого использования".
Прозрачные промывные воды исследуют полностью по методике, применяемой
для исследования воды, без сливания надосадочной жидкости.
Образовавшийся почвенный осадок исследуют по методике,
применяемой для исследования почвы в соответствии с МУК 4.2.796-99
"Методы санитарно-паразитологических исследований", или нижеописанным
методом с применением флотационных растворов (прописи флотационных
растворов даны в Прилож. 4).
5.1.6. Осадок помещают в центрифужные пробирки, заливают 3%-ным
раствором щелочи (NaOH или KOH) в соотношении 1:2, тщательно
перемешивают стеклянными или деревянными палочками и оставляют на 30
мин.
5.1.7. Затем центрифугируют 5 мин. при 2000 об./мин. и
надосадочную жидкость сливают.
5.1.8. К осадку в пробирках добавляют один из флотационных
растворов (удельный вес 1,38 - 1,4) в соотношении 1:2 и тщательно
перемешивают стеклянной (деревянной) палочкой.
5.1.9. Затем пробирки устанавливают в штатив, добавляют
флотационный раствор до образования выпуклого мениска по краю
центрифужной пробирки и накрывают покровным стеклом до соприкосновения
с мениском. Оставляют на 20 - 30 мин.
5.1.10. Поверхностную пленку снимают покровным стеклом, переносят
висячую каплю на предметное стекло и микроскопируют (окуляр 10х,
объектив 10х, 40х).
5.1.11. При исследовании на простейшие предварительно, перед
переносом висячей капли, на предметное стекло наносят каплю 1%-ного
раствора Люголя.
5.2. Исследование овощей, плодов, бахчевых с отбором проб методом
смывов
При исследовании крупных наземных плодов, овощей, бахчевых с
гладкой поверхностью можно применять для исследования на гельминты
метод смыва.
5.2.1. Отбор проб методом смыва.
Для каждой группы исследуемых объектов (одноименных продуктов от
партии) берут отдельную пробирку и кисточку, которые соответственно
нумеруют.
Центрифужные пробирки устанавливают в штатив, наливают в каждую
по 4 - 5 мл 20%-ный раствор глицерина и помещают кисточку.
Кисточкой, смоченной в растворе глицерина, многократно и с
нажимом смывают с поверхности 10 - 15 экземпляров одноименного
продукта с таким расчетом, чтобы общая площадь смыва составляла 0,5 -
1,0 кв. м. При этом после каждого смыва кисточку ополаскивают в
одноименно пронумерованной пробирке и отжимают о края пробирки.
После смывов кисточки вкладывают в пробирки и доставляют в
лабораторию.
5.2.2. Исследование смывов.
В каждую пробирку с кисточкой наливают по 5 - 6 мл одного из
флотационных растворов (уд. вес 1,38 - 1,4), в котором кисточку
многократно и тщательно промывают вертикальными и круговыми
движениями.
После промывки кисточку отжимают о края пробирки и удаляют.
Флотационный раствор добавляют в пробирки до образования
выпуклого мениска по краю центрифужной пробирки и накрывают покровным
стеклом до соприкосновения с мениском. Оставляют на 20 - 30 мин.
Поверхностную пленку снимают покровным стеклом, висячую каплю
переносят на предметное стекло.
Микроскопируют при увеличении: окуляр 10х, объектив 10х, 40х.
При исследовании на простейшие предварительно, перед переносом
висячей капли, на предметное стекло наносят каплю 1%-ного раствора
Люголя.
Одновременно целесообразно проводить исследования не более 4 - 5
пробирок, т.к. при большем количестве увеличивается время экспозиции,
что приведет к кристаллизации соли флотационного раствора и высыханию
капли.
5.3. Исследование овощей, столовой зелени, травы на личинки
гельминтов
Столовую зелень и другую растительную продукцию исследуют на
наличие личинок нематод (стронгилоид, анкилостом) по методу Бермана
или Супряги и адолескариев трематод по методу Котельникова и Акулина в
соответствии с МУК 4.2.796-99 "Методы санитарно-паразитологических
исследований". Наибольшее количество личинок стронгилят обнаруживают в
прикорневой части в 3 - 5 см от поверхности почвы.
Для идентификации личинок паразитических нематод от
свободноживущих применяется метод Корта.
5.4. Метод Корта
Принцип его заключается в воздействии на личинок нематод
формалином. При этом личинки свободноживущих нематод погибают быстрее,
чем паразитические. Жидкость с личинками помещают в чашку Петри или на
часовое стекло. При добавлении 40%-ного раствора формалина к жидкости
с личинками нематод (в соотношении 1:5) личинки свободноживущих
нематод гибнут через 5 - 8 мин., а паразитические - остаются живыми в
течение 15 - 20 мин., но подвижность их замедляется.
|
Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПЛОДООВОЩНОЙ, ПЛОДОВО-ЯГОДНОЙ И РАСТИТЕЛЬНОЙ ПРОДУКЦИИ".