Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ И ПИЩЕВЫЕ ДОБАВКИ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ (ГМИ) РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ.".
МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК С ПРИМЕНЕНИЕМ ТЕХНОЛОГИИ WIZARD, PROMEGA С ПРИМЕНЕНИЕМ НАБОРА РЕАКТИВОВ PROMEGA Подготовка пробы (раствора ДНК) Навеску исследуемого продукта массой 150 - 200 мг поместить в микроцентрифужную пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 мл. Добавить 300 мкл буфера I, тщательно растереть пробу в пробирке пестиком до гомогенного состояния. Добавить 500 мкл буфера II, перемешать на аппарате для встряхивания типа "Вортекс". Инкубировать при 65 град.C 40 - 60 мин., перемешать на аппарате для встряхивания, охладить до комнатной температуры. Добавить 500 мкл буфера III, перемешать на аппарате для встряхивания типа "Вортекс" в течение 2 мин. Центрифугировать 7 мин. на настольной микроцентрифуге типа Эппендорф при частоте вращения 13000 об./мин. Перенести 1000 мкл супернатанта в чистую пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 мл. Добавить 500 мкл смолы Wizard MaxiPreps. Перемешать на аппарате для встряхивания типа "Вортекс". При помощи стерильного шприца емкостью 2 мл прокачать смесь через микроцентрифужную колонку. Новым стерильным шприцем емкостью 2 мл прокачать через микроцентрифужную колонку 2 мл промывочного буфера. Поместить микроколонку в микроцентрифужную пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 мл. Центрифугировать 1 мин. при частоте вращения 12000 об./мин. Поместить микроколонку в чистую микроцентрифужную пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 мл. Добавить в колонку 100 мкл деионизованной воды. Центрифугировать 1 мин. при частоте вращения 12000 об./мин. Полученный раствор ДНК готов для проведения ПЦР, хранить при минус 20 град.C. |
Фрагмент документа "МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ И ПИЩЕВЫЕ ДОБАВКИ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ (ГМИ) РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ.".