МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ. ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ И ПИЩЕВЫЕ ДОБАВКИ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ (ГМИ) РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ.. Методика. Главный государственный санитарный врач РФ. 06.03.04 МУК 4.2.1902-04

8. Проведение электрофореза в агарозном геле

     Приготовление агарозного геля
     Для  приготовления  2%-ной  агарозы  необходимо  к  1  г  агарозы
добавить 50 мл 1х буфера ТВЕ и тщательно перемешать.
     Полученный раствор поместить в микроволновую печь (на 2 - 5 мин.,
в  зависимости  от  мощности  печи  следить  за интенсивностью кипения
суспензии!)  или  прокипятить  на  водяной  бане  15  мин.  до полного
растворения агарозы.
     Расплавленную агарозу  охладить  до  56  град.С  и добавить 5 мкл
бромистого этидия (концентрация 10 мг/мл), тщательно перемешать.
     Расплавленную    агарозу    с   бромистым   этидием   разлить   в
подготовленную форму. Толщина геля 0,5 - 0,7 см.
     Через 30   -   40  мин.  удалить  гребенку.  Готовый  гель  можно
использовать сразу,  можно хранить в 1х буфере в  холодильнике  при  4
град.С.
     Проведение электрофореза
     Смешать  в отдельной пробирке 2 мкл буфера для нанесения и 10 мкл
реакционной  смеси.  Внести  смесь  в  лунки геля. (Можно использовать
соотношение  буфер/реакционная  смесь  - 2/8.) В одну из лунок (чаще в
крайнюю) внести маркер молекулярной массы (можно 100 Вр).
     Поместить   заполненный   гель   в   камеру   для  электрофореза,
заполненную  буфером 1х ТБЕ. Толщина слоя буфера над поверхностью геля
примерно 2 - 3 мм.
     В   режиме  постоянного  напряжения  100  V  электрофорез  длится
примерно 70 - 90 мин.
     Гель   (без   формы)  поместить  на  фильтр  трансиллюминатора  и
посмотреть в проходящем ультрафиолетовом свете.
     Документировать  результат  фореза  либо  на  фотопленку  "Микрат
Изопан"  (изопанхроматическая фотопленка чувствительностью 3 ед. ГОСТ,
фотографическая широта 10, разрешение - 300 линий/мм), либо при помощи
гельдокументирующей  системы.  Фотокопия  геля должна быть приложена к
отчету  по  идентификации  (при  цифровой  съемке - распечатывается на
принтере с разрешением не менее 300 dpi).